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血清蛋白western上樣內(nèi)參
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最近需要做幾個(gè)血清蛋白的western驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，由于沒(méi)有內(nèi)參，所以采用麗春紅染色作為上樣內(nèi)參，但是重復(fù)做了好幾次染出來(lái)的條帶深淺都不是很一致，查了好幾篇文獻(xiàn)都只是在文中提了一句用麗春紅作上樣內(nèi)參，沒(méi)有說(shuō)具體的判斷方法，不知道是用的肉眼還是灰度掃描，而且有的時(shí)候文獻(xiàn)里面兩條染色明顯有差異的條帶也拿出來(lái)做內(nèi)參，讓人感覺(jué)很疑惑，希望大家能夠指點(diǎn)一下麗春紅染色作內(nèi)參的注意事項(xiàng)，謝謝。下圖是我染色后的pvdf膜 TM截圖未命名.jpg |
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yanshuai511
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7樓2013-11-06 20:39:21
cicelyzh
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| 沒(méi)有做過(guò)你的樣品。用麗春紅染膜只要是看大量表達(dá)蛋白的情況。常用的內(nèi)參的表達(dá)量也是很高的。所以可以看主要帶是否灰度相同。但是由于樣品的處理不同，有時(shí)候會(huì)造成某些大量表達(dá)蛋白的變化，但總有一些蛋白的表達(dá)還是不變你。你可以選擇不受樣品處理影響的蛋白做內(nèi)參。 |
2樓2013-11-04 01:34:13
3樓2013-11-04 13:34:23
cicelyzh
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