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昭夕1988

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[求助] western之抗體選擇問(wèn)題

我用Native-PAGE跑的胰島素，轉(zhuǎn)膜后用麗春紅可以染出條帶，但用博奧森的胰島素抗體和goat anti-rabbit lgG/HRP（TBST稀釋的）4度過(guò)夜孵育后，加ECL用凝膠成像儀曝光卻不顯影，是怎么回事？ECL配制出來(lái)是淡棕色還是無(wú)色？具體操作是什么，怎樣才能讓ECL均勻覆蓋在膜上？謝謝

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1樓 2013-11-03 20:48:03

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彤彤winni

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博奧森的抗體做不出來(lái)很正常的，我買(mǎi)的β-actin還有問(wèn)題呢。可以換別家的抗體試試。

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人生若只如初見(jiàn)

7樓2013-11-05 21:35:38

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sc5921041

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抗體用TBST+3-5%的奶粉稀釋。 ECL 顯影液有一點(diǎn)就可以了，可以拿槍頭吹打到膜上

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nostalgia

2樓2013-11-04 00:24:22

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cicelyzh

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你的一抗是抗兔的嗎？

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3樓2013-11-04 01:25:59

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3樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-04 01:25:59
你的一抗是抗兔的嗎？

rabbit anti-insulin

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4樓2013-11-04 09:57:38

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普通表情龍兔虎貓

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