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DGGE圖模糊，沒有特別亮的條帶是什么原因
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最近一直在做DGGE,每次圖都有問題，這次的圖比之前的稍微好點，可是還是條帶模糊，請問各位是什么原因呢？ 1.從左邊數(shù)1-4是一種樣品，只是上樣量不同，有4管濃縮成的10μ，15μ，20μ的樣，還有8管濃縮成的10μ的樣。5-8也是同樣的上樣量。 可以發(fā)現(xiàn)，不管加多少量，條帶的亮度都是一樣的。這很奇怪。 2.我是用的200V，4.5小時。 3.采用gel red染色，染色半小時。取1.5μ原液稀釋10000倍，然后均勻滴到膠上。個人感覺也可能與這種方法染色不均勻有關(guān)。不知道是不是。 4.膠濃度是35%-55%。 5.染色后發(fā)現(xiàn)泳道彎曲，是不是因為夾板沒有夾緊的原因呢？ Administrator 2013-11-02 19 時 49 分.jpg |
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2樓2013-11-07 17:40:28
3樓2013-11-07 21:10:40
4樓2013-11-07 22:19:56
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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5樓2013-11-08 18:50:52
laozuzunzhe
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lwzy888: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝你的回答！讓我知道了部分原因，DGGE條帶模糊還是不知道原因。 2013-11-09 06:42:28
lwzy888: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝你的回答！讓我知道了部分原因，DGGE條帶模糊還是不知道原因。 2013-11-09 06:42:34
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lwzy888: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝你的回答！讓我知道了部分原因，DGGE條帶模糊還是不知道原因。 2013-11-09 06:42:28
lwzy888: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝你的回答！讓我知道了部分原因，DGGE條帶模糊還是不知道原因。 2013-11-09 06:42:34
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我覺得下圖條帶彎曲變形可能是上樣濃度太高。 泳道彎曲是膠的問題，而且一般會有邊緣效應(yīng)，濃度高的條帶會對旁邊低濃度條帶產(chǎn)生影響。 |
6樓2013-11-08 23:12:39
7樓2013-11-09 06:37:56
8樓2013-11-09 06:46:21
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