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一路向南_J鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]PCR后跑膠結(jié)果如圖，請大家?guī)兔Ψ治鲆幌拢x謝各位
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提取RNA后反轉(zhuǎn)錄獲cDNA，再進(jìn)行PCR，跑膠后結(jié)果如圖（目的片段280左右）。marker左邊是用PCR mix做的，，前三個(gè)是樣品（模板量為3ul，引物1ul），第四個(gè)是質(zhì)粒做陽性對照（模板量為1ul，引物1ul）；marker右邊是用Taq酶做的，前三個(gè)是樣品（PCR buffer2.5ul，Mg1.5ul，dNTP 0.5ul，酶0.5ul，引物為0.5ul，模板5ul），第四個(gè)是質(zhì)粒做陽性對照（PCR buffer2.5ul，Mg1.5ul，dNTP 0.5ul，酶0.5ul，引物為0.5ul，模板1ul），第五個(gè)是質(zhì)粒做陽性對照（PCR buffer2.5ul，Mg1.5ul，dNTP 0.5ul，酶0.5ul，引物為1ul，模板1ul）。退火溫度為56度，延伸時(shí)間為45秒，30個(gè)循環(huán)。 請各位幫我分析一下，用mix做的為什么會在點(diǎn)樣空處特別亮？用Taq酶做的那一片亮是目的條帶嗎？應(yīng)如何改進(jìn)？ 謝謝各位了�。� Administrator 2013-11-04 19hr 08min.jpg |
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cicelyzh
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5樓2013-11-07 20:09:01
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