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windleakey金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
最近做轉(zhuǎn)化快瘋掉了
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因?yàn)槎緿NA的nano好像不好用了,所以只能通過(guò)肉眼看DNA濃度。 酶切膠回收后跑電泳,感覺(jué)濃度還可以,可是連接轉(zhuǎn)化后,就是不長(zhǎng)菌落! PCR產(chǎn)物連T載體成功,說(shuō)明連接酶沒(méi)問(wèn)題。用對(duì)照質(zhì)粒轉(zhuǎn)化成功,說(shuō)明轉(zhuǎn)化沒(méi)問(wèn)題。難道是酶切這步有什么問(wèn)題嗎? 做了好多次都失敗了,要崩潰了,求大神幫助啊,給些指點(diǎn)。 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
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不好意思,好像我描述的確實(shí)有點(diǎn)不清楚,其實(shí)實(shí)驗(yàn)很簡(jiǎn)單,就是從T載體上把我的目的片段切下來(lái)連到表達(dá)載體上。酶切后瓊脂糖電泳看,效果挺好的。膠回收后我也會(huì)跑個(gè)膠看一看。轉(zhuǎn)化有對(duì)照所以沒(méi)問(wèn)題。所以不知道還可能有什么其他的問(wèn)題 |
版主 (著名寫手)
己所不欲,勿施于人

金蟲(chóng) (小有名氣)
專家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
T.Shen
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專家經(jīng)驗(yàn): +57 |

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