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[求助]
WB上樣量不同導致結(jié)果不同,哪一次的結(jié)果可信呢?
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| 最近幾次WB做下來目的蛋白control和給藥組都沒有差異(條帶清晰,蛋白內(nèi)參顏色稍淡)。然后有老師建議減少上樣量。說上樣量太大,抗體飽和后可能導致怎么做都沒有差異。于是我降低上樣量做了一次,果然又有差異了。正好另外一個師姐在做其他蛋白,因為我所做的目的蛋白轉(zhuǎn)膜后也在她那張膜上。她和我用的是同一批樣品。所以我就請她把那張膜剪開,順便把我要做的膜也孵上了抗體看看。然后她的上樣量介于我第一次和第二次之間。抗體濃度比第一次降低了一些。做出來結(jié)果又沒有差異了。我被搞暈了。到底哪一次的結(jié)果才可信。慷覘l帶都比較清楚。而有差異的也是比較明顯的那種。你們遇到這種情況怎么辦呢?重復幾次?要是每次重復結(jié)果都不一樣那又怎么辦呢? |
蛋白質(zhì)生物學實驗經(jīng)驗 |
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