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Hairlessape新蟲 (初入文壇)
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[求助]
【求助】新手想在目標(biāo)蛋白后加Flag tag方法請(qǐng)教
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| 實(shí)驗(yàn)室有質(zhì)粒帶有目標(biāo)蛋白,但不帶TAG,現(xiàn)在想在蛋白后加flag以用于后期蛋白質(zhì)提取、純化。在網(wǎng)上一時(shí)沒搜尋到資料,故在此發(fā)帖。如何從何做起呢,方法有哪些,有經(jīng)驗(yàn)的蟲友請(qǐng)不吝賜教。! |
【分子生物】EPI帖 |
木蟲 (正式寫手)
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如果已有的質(zhì)粒上的目的序列是酶切連上去的,那就 1. 酶切,留載體框架 2.用質(zhì)粒做模板,pcr目的序列,反向引物上加上flag核酸序列(順序別反了),回收pcr產(chǎn)物,酶切 3.連接,1+2即可 如果是重組方式構(gòu)建的, 1.需要原始不帶目的序列的載體 2.用質(zhì)粒做模板,pcr目的序列,反向引物上加上flag核酸序列(順序別反了)還有重組位點(diǎn)序列,回收pcr產(chǎn)物 3.重組,1+2 |
木蟲 (職業(yè)作家)
新蟲 (初入文壇)
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木蟲 (正式寫手)
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[論文投稿]
申請(qǐng)回稿延期一個(gè)月,編輯同意了。但系統(tǒng)上的時(shí)間沒變,給編輯又寫郵件了,沒回復(fù)
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wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
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[考研] 288求調(diào)劑,一志愿華南理工大學(xué)071005 +5 | ioodiiij 2026-03-17 | 5/250 |
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[考研]
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zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
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