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lp_0820木蟲 (著名寫手)
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[求助]
還原性谷胱甘肽含量的測(cè)定
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我查了很多的文獻(xiàn)，在測(cè)定還原性GSH的時(shí)候第一步先是加入GR測(cè)定總的GSH(GSH+GSSG)，然后在加入2-VP測(cè)定氧化態(tài)的GSH（GSSG）。然后通過兩者之差計(jì)算出還原性的GSH含量。 我想問的是：是不是在第一步中不加入GR，直接測(cè)定出來(lái)的就是還原性的GSH呢？ 如果不是，原因是什么？ |
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starseacow
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| 不加入GR，無(wú)法測(cè)出還原性GSH。試劑盒如果用GSH于DTNB反應(yīng)測(cè)定，則整個(gè)反應(yīng)體系是處于循環(huán)狀態(tài)的，GSH與GSSG相互轉(zhuǎn)化。只有在NADPH和GR存在條件下，GSH+GSSG總量為一個(gè)定值，此時(shí)，通過與DTNB反應(yīng)，GSSG轉(zhuǎn)化為GSH，逐步消耗NADPH，TNB量逐步增加，通過記錄412 nm吸光度可以獲得總GSH+GSSG量。之后，通過特定試劑處理測(cè)定GSSG含量，兩個(gè)值相減獲得GSH量。關(guān)于這個(gè)反應(yīng)的原理我記得不是很清楚了，可能描述有誤，希望懂行的蟲友指正。 |
2樓2013-11-19 03:23:14
lp_0820
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3樓2013-11-21 13:37:42
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