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求高手指點(diǎn)金蟲 (小有名氣)
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依利特C18色譜柱問題
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| 本人最近在使用依利特C18ODS 5微米的色譜柱用于分析 頭孢類物質(zhì)。 分析的樣品里有頭孢氨芐、7-ADCA、苯甘氨酸甲酯、苯甘氨酸四種物質(zhì)。 流動相使用10mMPH7.0的磷酸鹽緩沖液70%:甲醇30% 這樣分析使用會出現(xiàn)問題? 剛開始峰形很好,但是打了幾次就出現(xiàn)了肩峰。我懷疑可能是樣品沒有過膜。柱子是新買的。 無奈之下,我只能反向使用柱子,并且樣品都過膜,剛開始使用峰形很好,但是今天使用流動相時,每進(jìn)一針樣品,柱壓就升高一點(diǎn),最后柱壓達(dá)到了190bar,,,,之后用10%甲醇洗的時候柱壓上升到250,后面逐漸降低到160,求解釋原因,是柱子不適合分析我這個樣品還是流動相不行???或者是前面沒有過膜的樣品污染了柱子,反向打和洗的時候再次污染了???? 求解釋。。。。 |
木蟲 (著名寫手)
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