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踮起腳尖2012銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
新人做藥代，請教血漿藥物濃度測定問題
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測大鼠血漿中藥物濃度，請問怎么用HPLC定量��？想用外標(biāo)法。 現(xiàn)有兩種想法。 1、做好標(biāo)準(zhǔn)曲線后，每次進(jìn)一針處理好的血樣，然后從工作曲線上查濃度。這樣因?yàn)椴皇且淮瓮瓿�，液相每天每次�?huì)有波動(dòng)，會(huì)不會(huì)造成測定數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確？ 2、做好標(biāo)準(zhǔn)曲線后，每次進(jìn)一針已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，進(jìn)一針處理好的血樣，用外標(biāo)一點(diǎn)法定量，這樣可以嗎？ 請問哪種方法比較好，還是有更好的第三種方法？ 請指教，請指教，請指教，請指教，請指教，請指教！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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藥動(dòng)的話標(biāo)曲也須以血漿為基質(zhì)進(jìn)行測定，一般的方法為：**ul血漿+**混標(biāo)溶液,混合后按樣品相同的處理方法處理（如醇沉-濃縮-復(fù)溶）后進(jìn)行檢測，形成標(biāo)曲，然后你再走樣品就可以根據(jù)標(biāo)曲算出濃度了。 一般來說，藥動(dòng)標(biāo)曲每天需要做一條（特別是質(zhì)譜測定的話），波動(dòng)當(dāng)然會(huì)存在，所以要進(jìn)行方法學(xué)的考察，如精密度、穩(wěn)定性等。質(zhì)譜的話RSD在15%以內(nèi)就算合格，LLOD可以在20%以內(nèi) |
4樓2013-11-23 17:30:58
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一般藥動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)曲線都是加內(nèi)標(biāo)的，如果標(biāo)曲y=ax+b，一般標(biāo)曲的話它的Y代表的意思是被測物峰面積，采用內(nèi)標(biāo)后y代表的意思就是被測物/內(nèi)標(biāo)峰面積所得的比值。 標(biāo)曲具體操作是這樣的：打個(gè)比方，200ul血漿+50ul不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液+20ul內(nèi)標(biāo)溶液，然后進(jìn)行處理。 液相的話波動(dòng)小，如果能在要求范圍內(nèi)，一條標(biāo)曲也是可以的。具體可以看你樣品量的多少。 |
9樓2013-11-24 17:32:06
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10樓2013-11-24 18:09:39
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