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sckcf銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
請問設(shè)計(jì)引物前為什么要進(jìn)行同源性比較??
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如題設(shè)計(jì)引物前為什么要進(jìn)行同源性比較??怎樣進(jìn)行同源性比較。。是和誰比較同源性比較。?比較了同源性又怎樣根據(jù)它設(shè)計(jì)引物???跪求分子高手幫忙???![]() |
木蟲 (正式寫手)
鐵桿木蟲 (文壇精英)
新蟲 (小有名氣)
| 同源性比較是看引物特異性如何的。比如你是以人類基因組為模板,設(shè)計(jì)的引物對除了和你擴(kuò)增的靶點(diǎn)完全配對外,可能還有多個(gè)結(jié)合位點(diǎn),這樣引物擴(kuò)增效率會(huì)降低,也可能有非特異性產(chǎn)物帶。實(shí)際操作中,同源性比較沒有太大意義,因?yàn)檎蛞铮聪蛞锿瑫r(shí)有非特異性結(jié)合位點(diǎn)且片段大小和特異性產(chǎn)物帶相近的概率很低,尤其你擴(kuò)增的還是保守序列。所以不用糾結(jié)這個(gè)問題,PCR結(jié)果不好再分析。 |
銅蟲 (小有名氣)
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