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stickforver銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
為什么pKD46一直沒法轉(zhuǎn)進BL21(DE3)菌種
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| 最近在做Red重組實驗，想用Red重組系統(tǒng)敲除BL21(DE3)中的一個基因，可是實驗中發(fā)現(xiàn)pKD46一直沒法轉(zhuǎn)進BL21(DE3）中，本人用過化轉(zhuǎn)也用過電轉(zhuǎn)均失敗了。但同樣的操作，本人將pKD46轉(zhuǎn)到JM109（DE3）中卻很容易。希望各位給幫忙分析分析為什么pKD46質(zhì)粒就是轉(zhuǎn)不進BL21(DE3)中。此外，本人發(fā)現(xiàn)BL21(DE3)基因組上位于T7RNA聚合酶基因附近有一個exo-bet-gam基因簇，因為pKD46一直轉(zhuǎn)不進去，就想要是能誘導基因組上的exo-bet-gam基因簇表達也許也是能達到相同的效果，但是一直分析不出BL21(DE3)基因組上的exo-bet-gam基因簇受什么誘導。 |
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2樓2013-11-26 13:34:27
stickforver
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2013-11-27 14:59:31
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