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stickforver銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
為什么pKD46一直沒(méi)法轉(zhuǎn)進(jìn)BL21(DE3)菌種
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| 最近在做Red重組實(shí)驗(yàn)，想用Red重組系統(tǒng)敲除BL21(DE3)中的一個(gè)基因，可是實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)pKD46一直沒(méi)法轉(zhuǎn)進(jìn)BL21(DE3）中，本人用過(guò)化轉(zhuǎn)也用過(guò)電轉(zhuǎn)均失敗了。但同樣的操作，本人將pKD46轉(zhuǎn)到JM109（DE3）中卻很容易。希望各位給幫忙分析分析為什么pKD46質(zhì)粒就是轉(zhuǎn)不進(jìn)BL21(DE3)中。此外，本人發(fā)現(xiàn)BL21(DE3)基因組上位于T7RNA聚合酶基因附近有一個(gè)exo-bet-gam基因簇，因?yàn)閜KD46一直轉(zhuǎn)不進(jìn)去，就想要是能誘導(dǎo)基因組上的exo-bet-gam基因簇表達(dá)也許也是能達(dá)到相同的效果，但是一直分析不出BL21(DE3)基因組上的exo-bet-gam基因簇受什么誘導(dǎo)。 |
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stickforver
銀蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 554.5
- 散金: 40
- 帖子: 81
- 在線(xiàn): 89.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1607703
- 注冊(cè): 2012-02-09
- 專(zhuān)業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2013-11-27 14:59:31
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2樓2013-11-26 13:34:27
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