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[交流]
關(guān)于大質(zhì)粒提�。ǎ模危撂崛。�
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我查詢到一篇文獻，里面有幾個個步驟， １.異丙醇沉淀后，沉淀溶解在ＴＥ中， ２.用５Ｍ氯化鈉混勻，離心上清轉(zhuǎn)移到一個新管中， ３.再次異丙醇沉淀，離心沉淀溶解在ＴＥ中， ４.用９Ｍ氯化鋰靜置后離心上清轉(zhuǎn)移到新管中， ５.再次用異丙醇沉淀。 求解釋個步驟作用，和目的。 |
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biodai質(zhì)粒提取可以參考： 請自備50mL離心管、20mL離心管、異丙醇、70%乙醇 取50mL菌液，置于50mL離心管中，4000rpm 4℃離心5 min，徹底棄除上清。 ↓ 加入20mL溶液A，充分振蕩2min，使菌體充分懸浮，確保無絮塊存在。4000rpm 4℃離心5min，徹底棄除上清。 ↓ 加入2mL溶液I和40μL溶液B，充分振蕩2min，使菌體充分懸浮，確保無絮塊存在。 ↓ 加入4mL溶液II，蓋緊管蓋，輕輕顛倒混勻6次，注意整個管子的內(nèi)表面均需與溶液II接觸，室溫放置至溶液清亮。（一般為4-5min，如5min后溶液未變清亮，說明細菌過多，應(yīng)考慮減少菌液量。注意混勻手法要溫和，不要劇烈混合） 加入3mL溶液III，蓋緊管蓋，立即輕輕顛倒混勻8次，4℃放置5min。（此步注意要盡快混勻，但手法要溫和） ↓ 10000rpm 4℃離心15min，小心吸出上清，輕移至新的20mL離心管。（應(yīng)在離心機自動停轉(zhuǎn)后取出離心管，以免沉淀懸�。� ↓ 加入6mL異丙醇，充分混勻，室溫放置10min。 ↓ 10000rpm室溫離心15min，小心吸棄上清，將離心管倒置于吸水紙上，吸去殘余的液體。（應(yīng)在離心機自動停轉(zhuǎn)后取出離心管，以免沉淀懸�。� ↓ 加入3mL 70%乙醇，溫和震蕩30Sec，10000rpm離心10min，輕輕棄去上清。 ↓ 加入3mL 70%乙醇，溫和震蕩30Sec，10000rpm離心10min，輕輕棄去上清，倒置于干燥的吸水紙上2min。 ↓ 將離心管敞口室溫放置5min，晾干沉淀。 ↓ 加入100μL溶液IV，溫和震蕩2min，使沉淀完全溶解。 |
2樓2020-04-17 15:16:30
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