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liming82101920金蟲 (小有名氣)
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[求助]
請教 SMARTer RACE的幾個問題
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大俠們，最近在看SMARTer RACE的說明書，幾個問題不明白啊，困惑，特來求助： 1. SMATer技術(shù)據(jù)說其SMARTer引物以及CDS引物中都包含了Sif I的酶切位點GGCCXXXXXGGCC，我找了半天怎么沒找到？ 2.5‘race中合成了cDNA第一鏈時，在第一鏈的3’端已經(jīng)并入了SMARTer IIA的互補序列，那么在后續(xù)的第二鏈合成中為什么不繼續(xù)使用引導(dǎo)合成，而是使用了包含SMARTer IIA的LongUP引物？然后在得到完整的cDNA雙鏈后的擴增過程中為什么又將LongUP引物又改成了ShortUP？因為我覺得用SMARTer IIA或者繼續(xù)使用LongUP引物與GSP1搭配就能實現(xiàn)目的片段的大量擴增��？百思不解，請高手們解疑。 |
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liming82101920
金蟲 (小有名氣)
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