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liming82101920金蟲 (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)教 SMARTer RACE的幾個(gè)問(wèn)題
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大俠們，最近在看SMARTer RACE的說(shuō)明書，幾個(gè)問(wèn)題不明白啊，困惑，特來(lái)求助： 1. SMATer技術(shù)據(jù)說(shuō)其SMARTer引物以及CDS引物中都包含了Sif I的酶切位點(diǎn)GGCCXXXXXGGCC，我找了半天怎么沒(méi)找到？ 2.5‘race中合成了cDNA第一鏈時(shí)，在第一鏈的3’端已經(jīng)并入了SMARTer IIA的互補(bǔ)序列，那么在后續(xù)的第二鏈合成中為什么不繼續(xù)使用引導(dǎo)合成，而是使用了包含SMARTer IIA的LongUP引物？然后在得到完整的cDNA雙鏈后的擴(kuò)增過(guò)程中為什么又將LongUP引物又改成了ShortUP？因?yàn)槲矣X(jué)得用SMARTer IIA或者繼續(xù)使用LongUP引物與GSP1搭配就能實(shí)現(xiàn)目的片段的大量擴(kuò)增��？百思不解，請(qǐng)高手們解疑。 |
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liming82101920
金蟲 (小有名氣)
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