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dingcong1216新蟲 (小有名氣)
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[求助]
為什么PCR跑出來是這樣的 已有9人參與
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麻煩各位大俠幫忙看看,最近PCR跑出來的圖為什么會是這樣?跑了幾次都是這樣,每次都是新?lián)Q過的緩沖液,電泳槽也都洗過。 兩個圖都是1.5%的膠,第一個圖是90v,50min,第二個圖是100v,1個小時 20131212dcc.jpg 20131206dcc.jpg |
新蟲 (初入文壇)
| 你好,首先你要確定自己的marker是不是跑出來了,我看到有帶出現(xiàn)證明膠塊和電泳液是沒有問題的,我原來出現(xiàn)過這種情況,是電壓不穩(wěn)的問題,帶呈現(xiàn)彌散狀,是你的電壓沒有達(dá)到你的預(yù)期值。更換電泳儀試試。 |
木蟲 (小有名氣)
| 你的marker用的是什么?最亮的那條是多大。磕鉖CR目標(biāo)產(chǎn)物大小是多少?假定最亮的一條是1kb的話,那么第一張圖上排從左往右marker后的三個孔中的應(yīng)該是PCR加入的引物。這樣的話應(yīng)該不是電泳的問題而是PCR的問題,應(yīng)該再調(diào)整一下退火溫度,或者做個陽性對照。 |
至尊木蟲 (文壇精英)
主管區(qū)長 (文壇精英)
| 你看看你是跑時間太久了,我們實驗室的人一般采用110V,30min內(nèi),可是你的Marker跑的也不是很好呢,你試試換個電泳條件。此外,你看看你的Marker適不適合你的樣品。 |


新蟲 (小有名氣)
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