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原生質(zhì)體制備時(shí)如何過(guò)濾酶液,如何收集原生質(zhì)體 已有2人參與
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最近在做大麥糊粉層的原生質(zhì)體,遇到了很多的麻煩: 首先纖維素酶不溶解,用了CPW緩沖液,乙酸 緩沖液等等都不行; 第二,制備不了球形的原生質(zhì)體,在顯微鏡觀察都是絮狀的; 第三,不知道怎么過(guò)濾掉酶液; 第四,如何收集原生質(zhì)體,我按照一些文獻(xiàn)上方法,在10目的尼龍網(wǎng)上過(guò)濾,然后在用洗滌液在尼龍網(wǎng)上沖洗,收集細(xì)胞,我發(fā)現(xiàn)這過(guò)程中,收集率很低,而且原生質(zhì)體的密度液非常低。 還望各位大神不惜賜教,由衷的萬(wàn)分感激。 |

木蟲 (著名寫手)
| 酶液在55度左右加熱10分鐘,然后用轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)幾下很快會(huì)溶,收集用50-100um小孔的的小濾網(wǎng)(BD公司)過(guò)濾就行。你可以看看Jean Sheen的網(wǎng)站,上面有做擬南芥原生質(zhì)的詳細(xì)信息。 |
木蟲 (正式寫手)
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