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檸檬可樂星新蟲 (小有名氣)
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[求助]
使用M13F(-47)/M13R(-48)做菌落PCR,退火溫度設定為多少? 已有2人參與
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我要做克隆,載體是pMD 19-T,準備用M13F(-47)/M13R(-48)做菌落PCR,看引物合成單上給出的Tm值分別是65.52/56.98。以前聽說一對引物Tm值相差最好不要超過5,為什么這對查這么多,是正常的嗎?另外,實際做PCR時,退火溫度設定為多少合適呢? 有做過的高手 求指點 |

鐵桿木蟲 (正式寫手)

榮譽版主 (著名寫手)
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專家經驗: +24 |

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