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檸檬可樂(lè)星新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
使用M13F(-47)/M13R(-48)做菌落PCR,退火溫度設(shè)定為多少。 已有2人參與
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我要做克隆,載體是pMD 19-T,準(zhǔn)備用M13F(-47)/M13R(-48)做菌落PCR,看引物合成單上給出的Tm值分別是65.52/56.98。以前聽(tīng)說(shuō)一對(duì)引物Tm值相差最好不要超過(guò)5,為什么這對(duì)查這么多,是正常的嗎?另外,實(shí)際做PCR時(shí),退火溫度設(shè)定為多少合適呢? 有做過(guò)的高手 求指點(diǎn) |

榮譽(yù)版主 (著名寫(xiě)手)
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +24 |

鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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