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yingq1木蟲 (小有名氣)
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[求助]
相互作用蛋白通過分子篩后洗脫時(shí)間為什么延長(zhǎng)？
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LZ現(xiàn)在在做兩個(gè)蛋白的相互作用，在E。coli里面分別表達(dá)兩種蛋白并用HIS標(biāo)簽純化后成功得到大量?jī)煞N蛋白。然后在體外混合兩種蛋白后過分子篩，發(fā)現(xiàn)兩種蛋白的洗脫時(shí)間都延長(zhǎng)了（懷疑兩個(gè)蛋白都變小了？）， 但是把過柱子后收集的樣品跑SDS電泳后發(fā)現(xiàn)兩種蛋白大小都未變化，請(qǐng)大家說下還有什么可能的原因？ 以下先排除幾種可能： 1，柱子是預(yù)裝柱沒有問題，且做過上述試驗(yàn)后，又用同一個(gè)柱子分別跑了兩種蛋白，分子量和預(yù)期相同。 2，其中一個(gè)蛋白是單體，另外一個(gè)是4聚體。如果四聚體變小了有這種可能，但是另外一個(gè)蛋白是單體，無論如何也不會(huì)變小的。 請(qǐng)大家不吝指教，多謝了！ |
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2樓2013-12-23 14:01:11
yingq1
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
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3樓2013-12-24 00:42:41
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