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yingq1木蟲 (小有名氣)
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[求助]
相互作用蛋白通過分子篩后洗脫時間為什么延長?
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LZ現(xiàn)在在做兩個蛋白的相互作用,在E。coli里面分別表達(dá)兩種蛋白并用HIS標(biāo)簽純化后成功得到大量兩種蛋白。然后在體外混合兩種蛋白后過分子篩,發(fā)現(xiàn)兩種蛋白的洗脫時間都延長了(懷疑兩個蛋白都變小了?), 但是把過柱子后收集的樣品跑SDS電泳后發(fā)現(xiàn)兩種蛋白大小都未變化,請大家說下還有什么可能的原因? 以下先排除幾種可能: 1,柱子是預(yù)裝柱沒有問題,且做過上述試驗后,又用同一個柱子分別跑了兩種蛋白,分子量和預(yù)期相同。 2,其中一個蛋白是單體,另外一個是4聚體。如果四聚體變小了有這種可能,但是另外一個蛋白是單體,無論如何也不會變小的。 請大家不吝指教,多謝了! |
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木蟲 (小有名氣)
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