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liuqingrui5金蟲 (小有名氣)
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[求助]
為什么同樣的PCR條件結(jié)果重復(fù)不出來呢，P出來一次之后就P不出來了 已有10人參與
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| 為什么同樣的PCR條件結(jié)果重復(fù)不出來呢，P出來一次之后就P不出來了，重復(fù)了好幾次都不行，超級(jí)郁悶 |
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liuqingrui5
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3樓2013-12-30 20:48:35
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這得看你的需要擴(kuò)增的基因大小了，不過rTaq確實(shí)保真性不高，不建議你用PCR產(chǎn)物做模板P，很有可能就把突變片段給放大了，不過你現(xiàn)在關(guān)鍵是P都P不出來了，用你P的產(chǎn)物來做模板，其他條件和以前P的一樣，這實(shí)際就是驗(yàn)證你P不出來?xiàng)l帶是不是模板的問題~如果你用PCR產(chǎn)物P出來而用原來的模板P不出來那就說明你原來的模板可能出問題啦~并不一定是讓你回收連T載體的 |
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11樓2013-12-30 21:50:45
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小概率事件罷了 別灰心。。。。。。。。。 |
2樓2013-12-30 20:45:16
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你就把你已經(jīng)p出來的東西當(dāng)成模板，再p一次 或者 換個(gè)pcr做做看 |
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4樓2013-12-30 20:51:14
liuqingrui5
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5樓2013-12-30 20:53:54
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| 換taq酶，特別是一些easy taq mix ，只是適合于普通的pcr。如果引物需要的條件比較苛刻，那么建議你用LA或者Ex的酶。 |
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6樓2013-12-30 21:00:39
liuqingrui5
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7樓2013-12-30 21:04:49
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guanfeifei
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我也是只有taq酶的，偶爾有一次P出來就像中獎(jiǎng)似的。。。真讓人發(fā)瘋，好好總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，唉！ [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
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9樓2013-12-30 21:38:58
shefu1204
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