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swfssss新蟲 (初入文壇)
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[求助]
我要做電子克隆 已有1人參與
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生物信息學的作業(yè),要求電子克隆某個物種的某個未知基因,關(guān)鍵是我不知道要克隆什么基因! 我就想請問各位大俠,我該如何選擇我要克隆的基因?我怎么知道我要克隆的那個基因是否已經(jīng)有人克。▓蟮溃┻^了? 希望各位前輩賜教,感激不盡! |
至尊木蟲 (知名作家)
不良人
我是個外行,對嚴格的電子克隆內(nèi)容缺乏了解!僅就個人理解加以敘述!![]() 對于新基因,我個人理解分為兩類,以物種A、B加以區(qū)分。就單獨的A物種而言,沒有報道的就是新基因;同時對比A,B兩個物種,同一個基因在A中有報道,但是在B中沒有,那么這個基因在B中也是個新基因,也符合樓主的要求(僅僅是個人理解哈)![]() 對于克隆克隆,我向樓主推薦一個方法,不知道是否合適,就是“同源克隆法”![]() 比如說樓主現(xiàn)在的目標物種是A,樓主可以在A以外的其他物種中尋找目標基因,比如說B,或者其他模式生物,找相關(guān)途徑感興趣的基因,什么基因都可以。![]() 驗證這個基因是否在目標物種中已被研究,可以利用NCBI的BLAST,把序列粘進去,直接運行,看看是否在目標序列有高度同源的物種即可!如果目標物種有參考全基因組序列,那么直接拿那個基因與目標物種全基因組做比對,或者比對蛋白,蛋白相似性40%以上的都可以理解為具有同源性。 ![]() 如果目標物種沒有參考序列,我就不知道這個電子克隆要做到什么了,通常的方式是,比對除目標物種以為的其他物種的目標基因,找基因保守序列,然后根據(jù)保守序列設計引物,用目標物種的DNA做模板擴增,可以直接拿到目標基因在目標物種中的序列!![]() 祝樓主順利,再坐等高手的賜教! |

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