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lushuiw銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
T載體克隆做不出來，求幫助
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| 各位戰(zhàn)友們，lz在做目的基因與T載體連接，之后轉(zhuǎn)化到DH5α感受態(tài)，然后涂板，結(jié)果長(zhǎng)的特別密，挑到液體培養(yǎng)基搖菌，都是澄清的。大家誰(shuí)知道是怎么回事呀，做了好長(zhǎng)時(shí)間了。 |
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lushuiw: 金幣+3 2013-05-20 21:51:55
| 第一做陰性對(duì)照，看是否你的抗生素是否污染了；第二，檢測(cè)你的感受態(tài)細(xì)胞不轉(zhuǎn)化連接產(chǎn)物，直接涂板，看是否污染了。第三，放一個(gè)空板，看是否倒的培養(yǎng)基有污染。第四，同時(shí)做一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照。再做一個(gè)連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)。這五個(gè)板要同時(shí)做。然后看看結(jié)果，一定能檢測(cè)出來哪里出了問題。 |
3樓2013-05-19 09:44:55
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| 1、感受態(tài)轉(zhuǎn)化涂板前可在培養(yǎng)皿加點(diǎn)IPTG和x-gal用來挑轉(zhuǎn)化子（藍(lán)色的為沒轉(zhuǎn)化進(jìn)的，白色的是轉(zhuǎn)化了的）；2、用空質(zhì)粒轉(zhuǎn)化做個(gè)對(duì)照 |
4樓2013-05-19 11:04:32
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