 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1523 | 回復(fù): 20 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
常小晶鐵蟲 (小有名氣)
|
[求助]
PCR問題 已有5人參與
|
||
| 最近出現(xiàn)一些問題，PCR總是彌散的情況，也耗時一個月了。不知道給位是否出現(xiàn)過這樣的現(xiàn)象，如果有希望能給予一些指導(dǎo)和幫助，不勝感激。鑒于所做的內(nèi)容比較多，以附件的形式上傳，希望大家能費心點開閱讀，并群策群力。也看見小木蟲上面有這樣的現(xiàn)象出現(xiàn)，但是始終沒有最終的總結(jié)過哪里出現(xiàn)了問題，我也想借這個機(jī)會，自己出現(xiàn)的問題進(jìn)行總結(jié)，為以后的學(xué)弟學(xué)妹們做好總結(jié)，避免錯誤繼續(xù)發(fā)生，令人抓狂。歡迎大家，踴躍討論，最終解決問題。附件中，也許有表述不清的，請見諒。 |
回復(fù)此樓» 本帖附件資源列表
-
歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲僅提供交流平臺，不對該內(nèi)容負(fù)責(zé)。
本內(nèi)容由用戶自主發(fā)布，如果其內(nèi)容涉及到知識產(chǎn)權(quán)問題，其責(zé)任在于用戶本人，如對版權(quán)有異議，請聯(lián)系郵箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : pure_test_--_problem.doc
2014-01-03 10:13:55, 7.61 M
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有141人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
常小晶
鐵蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 54.8
- 帖子: 79
- 在線: 25.3小時
- 蟲號: 1523490
- 注冊: 2011-12-04
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
|
特別感謝您的解答，這是最靠譜和學(xué)術(shù)的一個。我先說明一下我的實驗，由于最近一個月內(nèi)出現(xiàn)這樣的問題，本人稍顯焦躁。上傳了一個我的報告，也是我的一些拙見，您給一些建議，PCR其實主要只有三個主要部分構(gòu)成：a 模板的制備 b PCR體系 c PCR程序 d 電泳體系 a,先說模板的制備：我也懷疑是模板的制備有問題，因為這個實驗室是新建的，好多東西都可能存在不確定性，模板是最可能存在的問題，包括藥品和儀器，這樣我用試劑盒提取排除了一些因素。電泳，因為我做的白菜種子，樣品很小，DNA含量雖不算很高，但是PCR足矣。排除了模板的問題。 b，PCR體系，PCR酶用的是全式金的，問過他們的銷售最近沒有市場上有酶問題的反應(yīng)，我去別的實驗室做過，一共兩個，進(jìn)行我的酶體系的實驗，顯示都沒有問題。 c，PCR程序，我所采用的程序是之前很好的程序，所以很長時間我都沒有將問題的重點放在這里面。始終覺得可能是引物出了毛病，我重新做的質(zhì)譜，還有電泳，以及多家公司合成比較，發(fā)現(xiàn)問題并沒有出現(xiàn)在這里。 d，電泳體系，我把別的實驗室的DNA和引物用我們的酶體系以及電泳體系實驗，效果很好，所以很多問題都排除了。 最近，我用相同的方法提取另一個白菜的品種的DNA，用另一對引物發(fā)現(xiàn)很好，平行實驗很好。所以我才覺得可能在某種程度上說是PCR程序的問題。 我看也有很多在小木蟲上面提問的，都出現(xiàn)這樣的問題，但是最后都沒有回答是怎樣解決的，呵呵，所以很好奇，如果有出現(xiàn)這樣情況的，聊一聊，對以后也有幫助，僅此而已。謝謝 |
9樓2014-01-03 16:12:19
yang0071
木蟲 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 207 (大學(xué)生)
- 金幣: 1573.4
- 散金: 9319
- 紅花: 21
- 帖子: 4041
- 在線: 647.7小時
- 蟲號: 50941
- 注冊: 2004-07-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2014-01-03 11:10:24
冷雁孤旅
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 39 (小學(xué)生)
- 金幣: 3724.6
- 散金: 600
- 紅花: 22
- 帖子: 1767
- 在線: 525.6小時
- 蟲號: 1816501
- 注冊: 2012-05-14
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
3樓2014-01-03 12:49:37
zhaolf
木蟲 (著名寫手)
胖虎愛唱歌
- 應(yīng)助: 37 (小學(xué)生)
- 金幣: 3356.7
- 紅花: 10
- 帖子: 1689
- 在線: 478.3小時
- 蟲號: 1872406
- 注冊: 2012-06-29
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
4樓2014-01-03 13:45:35
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +11 | 梨花珞晚風(fēng) 2026-03-17 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +6 | lucky呀呀呀鴨 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 384求調(diào)劑 +3 | 子系博 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 280求調(diào)劑 +11 | 咕嚕曉曉 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +11 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +6 | 梁茜雯 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級已過 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | Ma_xt 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +8 | 小材化本科 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +9 | 想上學(xué)吖吖 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +22 | rare12345 2026-03-18 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 材料與化工專碩調(diào)劑 +7 | heming3743 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 申博26年 +3 | 八6八68 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3 | xwt。 2026-03-19 | 3/150 |
|