sophia-yxh

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在做病毒的活性測定，在倒置顯微鏡先明顯看到細(xì)胞已經(jīng)皺縮死亡了，在96孔版中只是沒有辦法判斷是否飄起；但是加上mtt后，也被染上了紫色，而且整塊板子上的顏色是相同的，是怎么回事啊，板子是新的

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我是來學(xué)習(xí)的��！

1樓 2014-01-10 15:53:47

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MTT的監(jiān)測原理是線粒體中的琥珀酸脫氫酶還原MTT產(chǎn)生紫色的物質(zhì)，所以樓主看到的細(xì)胞皺縮不一定代表細(xì)胞線粒體或者細(xì)胞內(nèi)的琥珀酸脫氫酶活性降低或者消失。建議你用一下其他的方法監(jiān)測細(xì)胞的活性和狀態(tài)。

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2樓2014-01-10 18:11:08

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2樓: Originally posted by ixido at 2014-01-10 18:11:08
MTT的監(jiān)測原理是線粒體中的琥珀酸脫氫酶還原MTT產(chǎn)生紫色的物質(zhì)，所以樓主看到的細(xì)胞皺縮不一定代表細(xì)胞線粒體或者細(xì)胞內(nèi)的琥珀酸脫氫酶活性降低或者消失。建議你用一下其他的方法監(jiān)測細(xì)胞的活性和狀態(tài)。

用什么方法比較好呢？能給點(diǎn)建議嗎？

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3樓2014-01-10 20:28:44

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gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流！ 2014-01-10 23:19:18
sophia-yxh: 金幣+2, ★★★很有幫助 2014-01-12 12:54:35

有一些監(jiān)測細(xì)胞周期的試劑盒，還有監(jiān)測caspase活性的試劑盒，或者用臺酚藍(lán)染色后用流式監(jiān)測都可以嘗試一下。

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4樓2014-01-10 22:02:47

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4樓: Originally posted by ixido at 2014-01-10 22:02:47
有一些監(jiān)測細(xì)胞周期的試劑盒，還有監(jiān)測caspase活性的試劑盒，或者用臺酚藍(lán)染色后用流式監(jiān)測都可以嘗試一下。

我現(xiàn)在想起來了，在mtt染色兩小時(shí)的時(shí)候，還沒有發(fā)黑，但是3h后看得時(shí)候板子的底部都變黑了，會不會是血清的問題呀！因?yàn)閙tt我是直接家進(jìn)去的，沒有把里面的培養(yǎng)基吸掉。

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5樓2014-01-11 09:49:16

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引用回帖:

5樓: Originally posted by sophia-yxh at 2014-01-11 09:49:16
我現(xiàn)在想起來了，在mtt染色兩小時(shí)的時(shí)候，還沒有發(fā)黑，但是3h后看得時(shí)候板子的底部都變黑了，會不會是血清的問題呀！因?yàn)閙tt我是直接家進(jìn)去的，沒有把里面的培養(yǎng)基吸掉。
...

我做MTT的時(shí)候也沒有換液，是可以做出來的。先重復(fù)幾次看看，做一些正負(fù)對照。

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6樓2014-01-11 13:21:15

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6樓: Originally posted by ixido at 2014-01-11 13:21:15
我做MTT的時(shí)候也沒有換液，是可以做出來的。先重復(fù)幾次看看，做一些正負(fù)對照。...

好的。謝謝啦，還有，在96孔板中死亡的細(xì)胞是漂起來了嗎？我是做攻毒實(shí)驗(yàn)的，明顯能看到細(xì)胞皺縮，沒有了細(xì)胞形態(tài)，成碎片狀的，但就是沒有細(xì)胞漂浮，但是染色后卻和正常組是一樣的。而且在鏡下能明顯看到計(jì)量關(guān)系的。求解

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7樓2014-01-11 14:33:28

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引用回帖:

7樓: Originally posted by sophia-yxh at 2014-01-11 14:33:28
好的。謝謝啦，還有，在96孔板中死亡的細(xì)胞是漂起來了嗎？我是做攻毒實(shí)驗(yàn)的，明顯能看到細(xì)胞皺縮，沒有了細(xì)胞形態(tài)，成碎片狀的，但就是沒有細(xì)胞漂浮，但是染色后卻和正常組是一樣的。而且在鏡下能明顯看到計(jì)量關(guān)系 ...

細(xì)胞死亡會有不同的狀態(tài)，有可能會破碎，有可能只是皺縮。建議換其他的方式進(jìn)行檢測，或者再重復(fù)幾次。

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8樓2014-01-11 22:27:29

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