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pony3598木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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標(biāo)準(zhǔn)曲線方法求鑒定
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本人藥物化學(xué)專(zhuān)業(yè),不常使用標(biāo)準(zhǔn)曲線,F(xiàn)有一樣品,本人通過(guò)其他方法得到其中的目標(biāo)產(chǎn)物,并測(cè)定樣品中目標(biāo)物質(zhì)含量在5%左右,而提供樣品者堅(jiān)信其中必定還有40%以上的樣品,其理由是在247nm下HPLC圖中峰面積為40%,雖然我知道他這樣的推測(cè)不嚴(yán)謹(jǐn),但是為了更具說(shuō)服力,現(xiàn)在準(zhǔn)備做一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。打算采用如下實(shí)驗(yàn)方法: 波長(zhǎng)247nm,進(jìn)樣量10μl 取標(biāo)準(zhǔn)品25mg用色譜甲醇定容直5ml,取部分作為5mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液1。 取標(biāo)準(zhǔn)品1溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為2.5mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液2。 取標(biāo)準(zhǔn)品2溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為1.25mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液3。 取標(biāo)準(zhǔn)品3溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為0.625mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液4。 取標(biāo)準(zhǔn)品4溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為0.3125mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液5。 取標(biāo)準(zhǔn)品5溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為0.15625mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液6。 取標(biāo)準(zhǔn)品6溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為0.078125mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液7。 取標(biāo)準(zhǔn)品7溶液2.5ml定容至5ml,取部分作為0.039125mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液8。 通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液1至8的液相響應(yīng)值與濃度間的關(guān)系,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。 取樣品25mg,定容至5ml,測(cè)定響應(yīng)值,再通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線求樣品量。 以上實(shí)驗(yàn)步驟是否存在問(wèn)題,請(qǐng)不吝賜教!謝謝! |
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木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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其理由是在247nm下HPLC圖中峰面積為40% 不同物質(zhì)在247nm下峰面積占到40%,含量就40%了。!相同的色譜條件,多換幾個(gè)波長(zhǎng)來(lái)做,這個(gè)物質(zhì)的峰面積有可能大于40%,也有可能小于40%,你再問(wèn)問(wèn)提供樣品者如何解釋呢? 不同物質(zhì)靈敏度不同的。! 樓主工作曲線這么做太辛苦了,如果不太專(zhuān)業(yè)的話是可以的,專(zhuān)業(yè)一點(diǎn)你做出來(lái)的不一定可用了。你的LC沒(méi)有自動(dòng)進(jìn)樣器嘛?配制一個(gè)濃度,不同進(jìn)樣體積就可以了啊 希望對(duì)你有幫助哈 |
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