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我是傳奇456金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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請(qǐng)教關(guān)于載體中酶切位點(diǎn)和插入片段的問(wèn)題 已有3人參與
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往某載體中插入基因片段，我想請(qǐng)問(wèn)： 1.兩個(gè)酶切位點(diǎn)之間相隔10bp,我的插入片段有800左右，這樣效率高嗎？ 2.是否片段大的話(huà)，就需要用相隔堿基數(shù)較大的兩個(gè)酶切位點(diǎn)呢？ 拜謝！ |
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2014神蟲(chóng)浮云
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3樓2014-02-14 17:29:17
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2樓2014-02-14 16:48:51
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1. 切割效率與使用的限制性?xún)?nèi)切酶有關(guān)。通常情況下，10bp間隔是沒(méi)有問(wèn)題的。 2. 酶切效率與插入片段大小無(wú)關(guān)，片段過(guò)大會(huì)降低連接轉(zhuǎn)化效率。 |
4樓2014-02-15 12:24:10
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5樓2014-02-15 14:50:41
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