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[求助]
從未遇見的TA克隆中酶切位點丟失
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最近在做關于融合PCR的實驗。 先分別擴增A片段和B片段，在A片段左端加了PstI酶切位點，在B片段右端也加了PstI酶切位點，然后通過融合PCR將A和B連接起來。（由于這兩個片段很不好擴增，故采用2*Taq擴增，一般而言，做融合PCR都不會用Taq酶切來擴增的） 融合后連T載體測序，與原序列比對發(fā)現(xiàn)A和B確實已經融合上，但是AB片段兩端的酶切位點卻沒有了，不知道是什么原因，跪求大神指教，謝謝。 |
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