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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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lyyjackey

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[求助] 從未遇見的TA克隆中酶切位點(diǎn)丟失

最近在做關(guān)于融合PCR的實(shí)驗(yàn)。
先分別擴(kuò)增A片段和B片段，在A片段左端加了PstI酶切位點(diǎn)，在B片段右端也加了PstI酶切位點(diǎn)，然后通過融合PCR將A和B連接起來。（由于這兩個(gè)片段很不好擴(kuò)增，故采用2*Taq擴(kuò)增，一般而言，做融合PCR都不會(huì)用Taq酶切來擴(kuò)增的）
融合后連T載體測序，與原序列比對發(fā)現(xiàn)A和B確實(shí)已經(jīng)融合上，但是AB片段兩端的酶切位點(diǎn)卻沒有了，不知道是什么原因，跪求大神指教，謝謝。

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1樓 2014-02-18 20:40:51

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