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紅魔曼聯(lián)金蟲 (正式寫手)
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[求助]
胞內(nèi)酶 胞外酶鑒定 已有1人參與
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reallpf
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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跑2個(gè)電泳就知道了。 一個(gè)發(fā)酵周期做完后，將發(fā)酵液離心得上清，進(jìn)行SDS-PAGE； 同時(shí)將離心后的細(xì)胞，加緩沖液進(jìn)行破碎，離心，上清液進(jìn)行SDS-PAGE。 看你的目標(biāo)條帶是否出現(xiàn)。在上清液的PAGE膠中就是胞外酶；破碎后的PAGE膠中出現(xiàn)就是胞內(nèi)酶。 值得注意的是，若是胞內(nèi)酶，整個(gè)泳道都會(huì)有大小不一的條帶，需要你的表達(dá)量達(dá)到一定量，才能在SDS-PAGE中看出來。 若你的表達(dá)量較低，或者仍不能確定，將上述2塊PAGE膠進(jìn)行western試驗(yàn)，就可以確定你的酶時(shí)胞外還是胞內(nèi)了。 |
2樓2014-02-25 14:51:06
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