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[求助]
各位前輩,小蟲(chóng)重組質(zhì)粒雙酶切瓊脂糖電泳,沒(méi)有條帶,請(qǐng)求幫助..... 已有1人參與
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最左邊為Marker,左二、三為EcoR I,BamH I 雙酶切,左四為Hind III,左五為EcoR I,左六為 NdeI單酶切(目的片段有兩個(gè)NdeI酶切位點(diǎn)),最右邊兩個(gè)為從大腸桿菌工程菌中提取的重組質(zhì)粒。質(zhì)粒為pET28a,目的片段為1500左右。雙酶切體系為10ul,質(zhì)粒7ul 酶各0.5 buffer K 1ul。前輩們給看看 這張圖怎么個(gè)情況啊 (1 )重組質(zhì)粒7000左右,怎么跑到marker 10000還要大(2 )目的片段是通過(guò)EcoR I,BamH I 雙酶切鏈接上去的,現(xiàn)在雙酶切怎么沒(méi)有條帶(3)Hind III切完 怎么會(huì)是兩條帶 謝謝各位指導(dǎo)了 |
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