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各位前輩,小蟲重組質粒雙酶切瓊脂糖電泳,沒有條帶,請求幫助..... 已有1人參與
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最左邊為Marker,左二、三為EcoR I,BamH I 雙酶切,左四為Hind III,左五為EcoR I,左六為 NdeI單酶切(目的片段有兩個NdeI酶切位點),最右邊兩個為從大腸桿菌工程菌中提取的重組質粒。質粒為pET28a,目的片段為1500左右。雙酶切體系為10ul,質粒7ul 酶各0.5 buffer K 1ul。前輩們給看看 這張圖怎么個情況啊 (1 )重組質粒7000左右,怎么跑到marker 10000還要大(2 )目的片段是通過EcoR I,BamH I 雙酶切鏈接上去的,現在雙酶切怎么沒有條帶(3)Hind III切完 怎么會是兩條帶 謝謝各位指導了 |
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