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574759350鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
單酶切切不開的原因？
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| 本人設(shè)計一對引物進行一段基因的PCR擴增，引物兩端分別帶有Nco I和BamH I的酶切位點，將PCR產(chǎn)物膠回收后連接在T載體上然后利用兩個酶雙酶切，但是電泳圖譜顯示雙酶切結(jié)果跟單酶切圖譜一樣，因此將質(zhì)粒分別利用BamH I和Nco I單酶切，驗證是哪個酶的原因，結(jié)果顯示BamH I切開但Nco I未切開，因此用Nco I酶切另一含有位點的質(zhì)粒，結(jié)果切開了，表明Nco I沒有失活，這到底是什么原因？難道公司合成的引物有問題，Nco I位點突變了？ |
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machao8405
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