 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2095 | 回復(fù): 17 | |||
鬼羽帝魂木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
關(guān)于重組克隆實驗中遇到的比較奇怪的問題 已有3人參與
|
||
|
最近實驗中遇到一個比較奇怪的問題： 在一個載體上用AscI+SmaI切下一片斷，將目的基因連上（兩端為AscI+SmaI）。目的基因是通過SOE-PCR做的，中間為SfiI酶切位點. 挑單克隆后，重組質(zhì)粒要比原先的質(zhì)粒小，而且SfiI切不開�；蛟S有人說這是假陽性，我也知道，但奇怪的在下面。 我用載體上的另一個酶切位點SacI分別單酶切質(zhì)粒與重組質(zhì)粒，原先質(zhì)�？梢郧虚_線性化，而重組質(zhì)粒卻切不開。（兩者反應(yīng)條件一樣） 在構(gòu)建過程中，酶切位點SacI一直沒有進行改動。 一位師兄說，可能載體制備的有問題，載體斷開了。 我卻覺得我重新做了3次都這樣，是不是不是載體的問題？？？ 請各位分析一下，不勝感激。 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 相似案例 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有66人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 有用同源重組法進行基因克隆和載體構(gòu)建的嗎？
已經(jīng)有8人回復(fù)
西門吹雪170
榮譽版主 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 92 (初中生)
- 貴賓: 0.982
- 金幣: 27278.4
- 散金: 1072
- 紅花: 40
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 3092
- 在線: 438.7小時
- 蟲號: 1209807
- 注冊: 2011-02-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 認知科學
- 管轄: 分子生物
2樓2014-03-03 22:21:45
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
鬼羽帝魂: 金幣+4, ★有幫助 2014-05-31 16:45:36
鬼羽帝魂: 金幣+4, ★有幫助 2014-05-31 16:45:36
|
可以試試這篇論文的方法，雖然是個小的改進，但是值得一試，而且很方便： http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256 |
17樓2014-03-25 09:41:59
  |
3樓2014-03-03 22:35:02
|
|
4樓2014-03-03 22:35:46
liygmail
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 31 (小學生)
- 金幣: 14357.4
- 紅花: 5
- 帖子: 3410
- 在線: 820.3小時
- 蟲號: 280786
- 注冊: 2006-09-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學
5樓2014-03-03 23:00:57
鬼羽帝魂
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 183 (高中生)
- 金幣: 3100.2
- 散金: 19
- 紅花: 12
- 帖子: 1427
- 在線: 186.8小時
- 蟲號: 2538789
- 注冊: 2013-07-09
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
6樓2014-03-04 10:50:59
鬼羽帝魂
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 183 (高中生)
- 金幣: 3100.2
- 散金: 19
- 紅花: 12
- 帖子: 1427
- 在線: 186.8小時
- 蟲號: 2538789
- 注冊: 2013-07-09
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
7樓2014-03-04 10:53:18
西門吹雪170
榮譽版主 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 92 (初中生)
- 貴賓: 0.982
- 金幣: 27278.4
- 散金: 1072
- 紅花: 40
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 3092
- 在線: 438.7小時
- 蟲號: 1209807
- 注冊: 2011-02-22
- 性別: MM
- 專業(yè): 認知科學
- 管轄: 分子生物
8樓2014-03-04 11:55:05
小月亮1990
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 8.3
- 帖子: 22
- 在線: 5小時
- 蟲號: 2721509
- 注冊: 2013-10-13
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
9樓2014-03-04 12:00:07
| 祝福 |
10樓2014-03-04 12:44:41
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 學員fBlk6m 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 26考研一志愿中國石油大學(華東)305分求調(diào)劑 +4 | 嘉年新程 2026-03-15 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +3 | rmc8866 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 310求調(diào)劑 +3 | baibai1314 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +9 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+8
|
.6lL 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學）304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +15 | 陌の森林 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學大學 ，080500材料科學與工程學碩，總分289分 +4 | @taotao 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿]
申請回稿延期一個月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復(fù)
 10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料學碩318求調(diào)劑 +5 | February_Feb 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學，生物學，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +5 | 陽陽哇塞 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 277調(diào)劑 +5 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學 生命科學與健康學院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 文思客 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學一志愿川大藥學327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|