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diguoxueye金蟲 (正式寫手)
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[交流]
測定蔬菜的MDA遇到的問題 已有2人參與
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我在測定MDA值的過程中遇到了幾個問題。 1.TBA的TCA溶液穩(wěn)定性比較差。TBA很難溶于TCA，所以，我是加熱溶解，結(jié)果溶液冷卻后，有出現(xiàn)少量的懸浮物。 2.同一批次的蔬菜樣品，都是采用100℃左右的溫度加熱15min（用電磁爐加熱，所以，溫度可能在100℃左右波動），采用同樣的實驗方法，結(jié)果測定的實驗數(shù)據(jù)中450nm的吸光值遠(yuǎn)大于532nm以及600nm處的吸光值。并且，平行實驗的結(jié)果的穩(wěn)定性很差，有時候，平行實驗的MDA含量都是正值，有時都是負(fù)值，有時候既有正值，又有負(fù)值，但是平行試驗之間的差值很大，甚至不再一個數(shù)量級上。有沒有什么辦法可以提高532nm吸光值，減小450nm處吸光值? 3.我采用的是下面的計算公式  其中，V0測定液體積是指什么？ 360軟件小助手截圖20140305114022.jpg |
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diguoxueye
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你好。如果我采用以下方法呢？稱取蔬菜樣品3g，30mL 100g/L TCA溶液，研磨，過濾。 再取4mL上清液（對照組：加4.0mL 100g/L TCA）,加4.0mL0.67%TBA，混合后在沸水浴中20min，取出冷卻，分別測定在450,532,600nm處波長。 請問下面這個公式是不是合適。 MDA=（6.45*（OD532-OD600）-0.559OD450）*V/(Vs*m*1000) V——樣品提取液總體積，mL Vs——測定時所取樣品提取液體積，mL m——樣品質(zhì)量，g 但是根據(jù)我自己的分析，這個公式好像不是很對。我覺得應(yīng)該是下面這個公式 MDA=（6.45*（OD532-OD600）-0.559OD450）*V*V1/(Vs*m*1000); V——樣品提取液總體積，mL Vs——測定時所取樣品提取液體積，mL m——樣品質(zhì)量，g V1——測定吸光度時的混合液總體積，mL 但是按照這兩個公式，計算出來的MDA都非常低，基本上在10的-2次方水平上。不知道是不是因為公式不正確。 |
4樓2014-06-12 11:13:10
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1.溶解速度確實慢，一般我是提前半天到一天的時間配好，有少量懸浮物也算正常，我做的時候也這樣。 2.當(dāng)時我也采用的你這個實驗方法，結(jié)果和你差不多，所以直接把這個指標(biāo)廢棄了。100℃水浴時，樣品都能沸騰，最好還是溫度低一些吧。師弟做的時候是改用80℃水浴，lz再查幾篇文獻(xiàn)查考一下吧。 3.V0就是你從VT中取出用來測定吸光度的提取液的體積。比如說，假設(shè)取10g鮮樣提取定容至100mL，這100mL就是VT，提取液總體積；量取1.0mL提取液放入試管，再加入5.0mLTBA，反應(yīng)后待測，那么這里所量取的1.0mL提取液就是V0。 |
2樓2014-03-05 12:59:10
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3樓2014-03-07 16:55:56
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5樓2014-06-12 21:02:46
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