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xxyscs7866金蟲 (小有名氣)
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[求助]
透射電鏡~觀察脂質(zhì)納米粒~應(yīng)如何制樣？？？ 已有1人參與
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各位大神好，在下做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候遇到了如題的問題 具體過(guò)程是這樣的…… 本人做的是納米粒包載藥物的一個(gè)載體，由有機(jī)的油脂、藥物和離子修飾過(guò)的有機(jī)材料構(gòu)成。制備好后測(cè)粒徑幾個(gè)樣品分別是20nm到120nm左右，委托某某大學(xué)測(cè)粒徑找了一個(gè)小時(shí)發(fā)現(xiàn)完全沒辦法找到我說(shuō)的粒徑范圍內(nèi)的微粒，或者說(shuō)視野內(nèi)根本看不到球�。「魑挥惺裁锤咭妴�？？？我只是想找到看到就可以了………… 我自己懷疑有幾種可能， 1支架不合適，我查文獻(xiàn)脂質(zhì)納米粒做TEM用的都是銅網(wǎng)，可是我們這邊貌似沒有銅網(wǎng)，人家制樣的老師看我沒要求就隨手給我用了個(gè)什么纖維神馬的膜，后來(lái)還說(shuō)要不你就用超薄碳膜吧，大神們覺得哪個(gè)能做出來(lái)？？？因?yàn)槔蠋熣f(shuō)這次的可能從纖維縫隙漏下去了 各位覺得是這個(gè)原因嗎？？ 2染色劑 受委托方給我們用的是乙醇配制的磷鎢酸，磷鎢酸本身貌似沒什么問題，我看文獻(xiàn)上都用這個(gè)，但是我的脂質(zhì)材料是醇溶的，我想會(huì)不會(huì)是在制樣的過(guò)程中出現(xiàn)了破乳？微粒直接溶完了��？？ 各位覺得是這種原因嗎？ 3我也猜不出來(lái)是什么原因了…………各位做脂質(zhì)納米粒一般都怎么具體操作的��？？？求教求救！��！ 跪謝…………  |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xxyscs7866: 金幣+5, ★★★很有幫助, 非常感謝您的回答 我的是在別的學(xué)校做的 所以制樣老師制的時(shí)候比較隨意 后來(lái)我才發(fā)現(xiàn)還有這么多問題 慢慢學(xué)習(xí)吧 謝謝你 2014-04-15 12:23:11
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xxyscs7866: 金幣+5, ★★★很有幫助, 非常感謝您的回答 我的是在別的學(xué)校做的 所以制樣老師制的時(shí)候比較隨意 后來(lái)我才發(fā)現(xiàn)還有這么多問題 慢慢學(xué)習(xí)吧 謝謝你 2014-04-15 12:23:11
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你說(shuō)的三點(diǎn)都太想當(dāng)然了，需要的話，我發(fā)下我拍的照片給你看看。 為什么不自己拍呢，自己的東西只有自己才是最了解的。 1.TEM用的都是銅網(wǎng)， 銅網(wǎng)上附著了碳纖維膜，膜在電鏡中由于電子束過(guò)強(qiáng)會(huì)破裂的，但可以很清晰地看到，及時(shí)破了，粒子絕不會(huì)漏下去的（你們的老師太水了），而且即使膜破了也是沒問題的，很常見，應(yīng)為一張銅網(wǎng)上有非常多的這樣的單元，破了幾個(gè)一點(diǎn)問題沒有。 2，負(fù)染的磷鎢酸為什么要用醇作溶劑？！這對(duì)銅網(wǎng)上的碳膜好嘛，對(duì)納米粒子也是非常不好的，用通常文獻(xiàn)上報(bào)到的濃度就可以，具體濃度現(xiàn)在記不清，找不到得會(huì)在QQ我，我ID就是我QQ號(hào)，記得最好過(guò)后調(diào)ph至中性。 3.你樣品的濃度控制好了沒？濃度太高太低都不好，脂質(zhì)納米粒一般濃度在0.1mg/m-0.5mg/ml比較好。 4.樣品制備是否正確：樣品稀釋至適當(dāng)濃度--滴加到銅網(wǎng)上--晾干（避免強(qiáng)光，高溫）--負(fù)染---晾干--檢測(cè)。（切記不要將銅網(wǎng)在樣品里蘸下，過(guò)后再在染色劑里蘸下）； 5：找區(qū)域的時(shí)候一定要細(xì)心，黑白交接的地方，淡淡的灰色的地方最有可能，有機(jī)粒子不想無(wú)機(jī)粒子或金屬粒子，比較難拍的 6，找到了比較好的區(qū)域后記得用不同的倍率多拍幾張，而且要將那個(gè)（bar）的位置以及那個(gè)單位調(diào)整好，要不然后面用圖片的時(shí)候會(huì)后悔的。 7：最后的忠告：1）你的東西絕對(duì)是能拍出來(lái)的，2）tem不像sem那樣好拍，尤其是有機(jī)粒子，更難拍，要多拍拍，過(guò)后你想拍不出來(lái)都難。 |
2樓2014-03-10 19:06:35
【答案】應(yīng)助回帖
| 忘記說(shuō)了，銅網(wǎng)可以自己在網(wǎng)上買，大概5塊錢一張，買了找老板報(bào)銷 |
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xxyscs78663樓2014-03-10 19:14:14
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4樓2014-03-16 20:42:34
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5樓2014-04-22 10:50:15
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6樓2014-04-22 10:53:35
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10樓2014-05-04 14:54:50
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