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xxyscs7866金蟲 (小有名氣)
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[求助]
透射電鏡~觀察脂質(zhì)納米粒~應(yīng)如何制樣??? 已有1人參與
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各位大神好,在下做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候遇到了如題的問題 具體過程是這樣的…… 本人做的是納米粒包載藥物的一個(gè)載體,由有機(jī)的油脂、藥物和離子修飾過的有機(jī)材料構(gòu)成。制備好后測粒徑幾個(gè)樣品分別是20nm到120nm左右,委托某某大學(xué)測粒徑找了一個(gè)小時(shí)發(fā)現(xiàn)完全沒辦法找到我說的粒徑范圍內(nèi)的微粒,或者說視野內(nèi)根本看不到球。「魑挥惺裁锤咭妴???我只是想找到看到就可以了………… 我自己懷疑有幾種可能, 1支架不合適,我查文獻(xiàn)脂質(zhì)納米粒做TEM用的都是銅網(wǎng),可是我們這邊貌似沒有銅網(wǎng),人家制樣的老師看我沒要求就隨手給我用了個(gè)什么纖維神馬的膜,后來還說要不你就用超薄碳膜吧,大神們覺得哪個(gè)能做出來???因?yàn)槔蠋熣f這次的可能從纖維縫隙漏下去了 各位覺得是這個(gè)原因嗎?? 2染色劑 受委托方給我們用的是乙醇配制的磷鎢酸,磷鎢酸本身貌似沒什么問題,我看文獻(xiàn)上都用這個(gè),但是我的脂質(zhì)材料是醇溶的,我想會不會是在制樣的過程中出現(xiàn)了破乳?微粒直接溶完了。? 各位覺得是這種原因嗎? 3我也猜不出來是什么原因了…………各位做脂質(zhì)納米粒一般都怎么具體操作的。??求教求救。! 跪謝………… |
金蟲 (著名寫手)
新藥研發(fā)&藥物分析
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你說的三點(diǎn)都太想當(dāng)然了,需要的話,我發(fā)下我拍的照片給你看看。 為什么不自己拍呢,自己的東西只有自己才是最了解的。 1.TEM用的都是銅網(wǎng), 銅網(wǎng)上附著了碳纖維膜,膜在電鏡中由于電子束過強(qiáng)會破裂的,但可以很清晰地看到,及時(shí)破了,粒子絕不會漏下去的(你們的老師太水了),而且即使膜破了也是沒問題的,很常見,應(yīng)為一張銅網(wǎng)上有非常多的這樣的單元,破了幾個(gè)一點(diǎn)問題沒有。 2,負(fù)染的磷鎢酸為什么要用醇作溶劑?!這對銅網(wǎng)上的碳膜好嘛,對納米粒子也是非常不好的,用通常文獻(xiàn)上報(bào)到的濃度就可以,具體濃度現(xiàn)在記不清,找不到得會在QQ我,我ID就是我QQ號,記得最好過后調(diào)ph至中性。 3.你樣品的濃度控制好了沒?濃度太高太低都不好,脂質(zhì)納米粒一般濃度在0.1mg/m-0.5mg/ml比較好。 4.樣品制備是否正確:樣品稀釋至適當(dāng)濃度--滴加到銅網(wǎng)上--晾干(避免強(qiáng)光,高溫)--負(fù)染---晾干--檢測。(切記不要將銅網(wǎng)在樣品里蘸下,過后再在染色劑里蘸下); 5:找區(qū)域的時(shí)候一定要細(xì)心,黑白交接的地方,淡淡的灰色的地方最有可能,有機(jī)粒子不想無機(jī)粒子或金屬粒子,比較難拍的 6,找到了比較好的區(qū)域后記得用不同的倍率多拍幾張,而且要將那個(gè)(bar)的位置以及那個(gè)單位調(diào)整好,要不然后面用圖片的時(shí)候會后悔的。 7:最后的忠告:1)你的東西絕對是能拍出來的,2)tem不像sem那樣好拍,尤其是有機(jī)粒子,更難拍,要多拍拍,過后你想拍不出來都難。 |

| 忘記說了,銅網(wǎng)可以自己在網(wǎng)上買,大概5塊錢一張,買了找老板報(bào)銷 |

金蟲 (小有名氣)
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