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xxyscs7866金蟲 (小有名氣)
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[求助]
透射電鏡~觀察脂質(zhì)納米粒~應(yīng)如何制樣？？？ 已有1人參與
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各位大神好，在下做實驗的時候遇到了如題的問題 具體過程是這樣的…… 本人做的是納米粒包載藥物的一個載體，由有機的油脂、藥物和離子修飾過的有機材料構(gòu)成。制備好后測粒徑幾個樣品分別是20nm到120nm左右，委托某某大學(xué)測粒徑找了一個小時發(fā)現(xiàn)完全沒辦法找到我說的粒徑范圍內(nèi)的微粒，或者說視野內(nèi)根本看不到球�。「魑挥惺裁锤咭妴�？？？我只是想找到看到就可以了………… 我自己懷疑有幾種可能， 1支架不合適，我查文獻脂質(zhì)納米粒做TEM用的都是銅網(wǎng)，可是我們這邊貌似沒有銅網(wǎng)，人家制樣的老師看我沒要求就隨手給我用了個什么纖維神馬的膜，后來還說要不你就用超薄碳膜吧，大神們覺得哪個能做出來？？？因為老師說這次的可能從纖維縫隙漏下去了 各位覺得是這個原因嗎？？ 2染色劑 受委托方給我們用的是乙醇配制的磷鎢酸，磷鎢酸本身貌似沒什么問題，我看文獻上都用這個，但是我的脂質(zhì)材料是醇溶的，我想會不會是在制樣的過程中出現(xiàn)了破乳？微粒直接溶完了啊？？ 各位覺得是這種原因嗎？ 3我也猜不出來是什么原因了…………各位做脂質(zhì)納米粒一般都怎么具體操作的啊？？？求教求救�。�！ 跪謝…………  |
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【答案】應(yīng)助回帖
| 忘記說了，銅網(wǎng)可以自己在網(wǎng)上買，大概5塊錢一張，買了找老板報銷 |
xxyscs7866
3樓2014-03-10 19:14:14
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xxyscs7866: 金幣+5, ★★★很有幫助, 非常感謝您的回答 我的是在別的學(xué)校做的 所以制樣老師制的時候比較隨意 后來我才發(fā)現(xiàn)還有這么多問題 慢慢學(xué)習(xí)吧 謝謝你 2014-04-15 12:23:11
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xxyscs7866: 金幣+5, ★★★很有幫助, 非常感謝您的回答 我的是在別的學(xué)校做的 所以制樣老師制的時候比較隨意 后來我才發(fā)現(xiàn)還有這么多問題 慢慢學(xué)習(xí)吧 謝謝你 2014-04-15 12:23:11
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你說的三點都太想當然了，需要的話，我發(fā)下我拍的照片給你看看。 為什么不自己拍呢，自己的東西只有自己才是最了解的。 1.TEM用的都是銅網(wǎng)， 銅網(wǎng)上附著了碳纖維膜，膜在電鏡中由于電子束過強會破裂的，但可以很清晰地看到，及時破了，粒子絕不會漏下去的（你們的老師太水了），而且即使膜破了也是沒問題的，很常見，應(yīng)為一張銅網(wǎng)上有非常多的這樣的單元，破了幾個一點問題沒有。 2，負染的磷鎢酸為什么要用醇作溶劑？！這對銅網(wǎng)上的碳膜好嘛，對納米粒子也是非常不好的，用通常文獻上報到的濃度就可以，具體濃度現(xiàn)在記不清，找不到得會在QQ我，我ID就是我QQ號，記得最好過后調(diào)ph至中性。 3.你樣品的濃度控制好了沒？濃度太高太低都不好，脂質(zhì)納米粒一般濃度在0.1mg/m-0.5mg/ml比較好。 4.樣品制備是否正確：樣品稀釋至適當濃度--滴加到銅網(wǎng)上--晾干（避免強光，高溫）--負染---晾干--檢測。（切記不要將銅網(wǎng)在樣品里蘸下，過后再在染色劑里蘸下）； 5：找區(qū)域的時候一定要細心，黑白交接的地方，淡淡的灰色的地方最有可能，有機粒子不想無機粒子或金屬粒子，比較難拍的 6，找到了比較好的區(qū)域后記得用不同的倍率多拍幾張，而且要將那個（bar）的位置以及那個單位調(diào)整好，要不然后面用圖片的時候會后悔的。 7：最后的忠告：1）你的東西絕對是能拍出來的，2）tem不像sem那樣好拍，尤其是有機粒子，更難拍，要多拍拍，過后你想拍不出來都難。 |
2樓2014-03-10 19:06:35
jjf139
金蟲 (著名寫手)
新藥研發(fā)&藥物分析
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- 專業(yè): 藥物分析
4樓2014-03-16 20:42:34
xxyscs7866
金蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 中藥制劑
5樓2014-04-22 10:50:15
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