 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 基因亞細胞定位
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1959 | 回復: 0 | ||
yuanzou2011新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
基因亞細胞定位
|
|
各位大蟲，有個問題急著想要請教一下！我用pBEGFP載體構建的重組基因，目的基因均在1800-2000bp，將夠好的重組基因轉入GV3101農桿菌，然后侵染煙草葉片，2天后觀察。結果只有對照（只有pBEGFP載體）的蛋白有表達，其它基因都沒有熒光。具體步驟如下： 1）、吸取已轉入目的重組基因的農桿菌菌液300 μL 到3 ml含有50 mg/ml卡那霉素和50 mg/ml潮霉素的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，直至OD600=0.5～0.6，約2h。 2）、取上述菌液1.5 ml離心，去上清液，加1 ml誘導液，置于28℃溫育2 h。誘導液的配制：1 ml 0.1 M MES buffer, pH 5.6；0.1 ml 1 M MgCl2；30 μL 50 mM acelosyringone (acetophenone)；加無菌水至10 ml。 3）、取50 μL 上一步所得菌液于1.5 ml離心管中，再加入950 μL 誘導液，測OD600，調OD600=0.1～1.0。 4）、將上一步所得菌液注射3個星期大的煙草葉片。 5）、48 h后，剪取小塊經注射的煙草葉片與熒光顯微鏡下觀看熒光反應。 怎么優(yōu)化一下實驗條件呢，各位大蟲，非常感激哦！ |
回復此樓» 猜你喜歡
材料專碩英一數(shù)二306
已經有6人回復
-
265求調劑
已經有4人回復
-
265求調劑
已經有7人回復
-
26調劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過A區(qū)線
已經有8人回復
-
281求調劑（0805）
已經有21人回復
-
0817 化學工程 299分求調劑 有科研經歷 有二區(qū)文章
已經有20人回復
-
279分求調劑 一志愿211
已經有6人回復
-
085600材料與化工 求調劑
已經有17人回復
-
能源材料化學課題組招收碩士研究生8-10名
已經有13人回復
-
317求調劑
已經有6人回復
找到一些相關的精華帖子，希望有用哦~
GO分析和KEGG pathway分析
已經有18人回復
- 亞細胞定位。。。
已經有5人回復
- 怎么使某一個基因在細胞內限量表達
已經有1人回復
- 蛋白質功能表達和功能驗證
已經有4人回復
- 能否抑制某一特地蛋白，基因敲除方法除外。
已經有3人回復
- 細胞提取蛋白，做western blotting，怎么知道是提取總蛋白還是膜蛋白呢？
已經有4人回復
- 目的基因的導入
已經有19人回復
- 知道一個基因在花中表達量高有什么用？
已經有13人回復
- 真核表達質粒構建
已經有4人回復
- 基因定位--葉綠體-線粒體-細胞核？？？
已經有12人回復
- 利用高代RIL群體定位基因
已經有10人回復
- 【求助/交流】表達載體pCAMBIA1304表達順序看不懂
已經有12人回復
- 基因表達分析怎樣做
已經有9人回復
- 推薦一本很實用的入門教材：分子生物學與基因工程實驗教程
已經有27人回復
- 關于農桿菌侵染洋蔥表皮
已經有9人回復
- 關于洋蔥表皮亞細胞定位的問題～～
已經有8人回復
- 【求助/交流】關于小麥突變基因精細定位
已經有4人回復
- 【求助/交流】求構載體高手 賜教構建亞細胞定位載體pCAMBIA1302
已經有4人回復
- 【求助/交流】抗病基因克隆或定位
已經有11人回復
- 【推薦】973 蛋白質主要降解途徑-細胞自噬的分子機制及功能
已經有9人回復
點擊這里搜索更多相關資源科研從小木蟲開始，人人為我，我為人人
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 yuanzou2011 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調劑 +4 | 梁梁校校 2026-03-17 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 081700化工學碩調劑 +3 | 【1】 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學材料求調劑，總分315（英一） +3 | sbdksD 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【考研調劑】化學專業(yè) 281分，一志愿四川大學，誠心求調劑 +5 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 招收調劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學0703化學318分，有科研經歷，求調劑 +3 | 一瓶苯甲酸 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +3 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學 ，070300化學學碩，總分287，雙非一本，求調劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學調劑，求各位老師收留 +10 | 秋有木北 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 304求調劑 +6 | 司空. 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 268求調劑 +6 | 簡單點0 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[基金申請] 被我言中：新模板不強調格式了，假專家開始管格式了 +4 | beefly 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 11408 一志愿西電，277分求調劑
+3
|
zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請]
今年的國基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856求調劑 +3 | 劉夢微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調劑 +4 | 學員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|