 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 5079 | 回復(fù): 24 | ||||
小牛石刀新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
RNA提取，怎么老是降解？求指導(dǎo)！！ 已有6人參與
|
|||
|
最近在提取植物（苜蓿）RNA，用的是博邁德的RNA提取試劑盒，多次提取經(jīng)過(guò)瓊膠電泳，條帶都很彌散，降解的厲害，求助原因！ 槍頭、離心管都是進(jìn)口的； 4度離心； |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有127人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 大家看看我這個(gè)革蘭氏陽(yáng)性菌的總RNA提取電泳圖是怎么回事
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 熒光定量的圖，求解釋啊
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 有關(guān)細(xì)胞總RNA提取
已經(jīng)有16人回復(fù)
- RNA 提取如何保證質(zhì)量
已經(jīng)有17人回復(fù)
- RNA 提取注意事項(xiàng) 和心得
已經(jīng)有9人回復(fù)
- RNA降解，求高人分析一下原因。
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 動(dòng)物肌肉提取RNA，為什么看起來(lái)18S比28S亮很多？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 提取RNA條帶28/18為什么總是不成兩倍關(guān)系啊？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 提取RNA是直接加Trizol還是胰酶消化后加Trizol？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 急啊，求助提取RNA前，植物葉片采集的問(wèn)題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 如何用trizol試劑保存RNA提取材料？請(qǐng)各位前輩指點(diǎn)指點(diǎn)，不甚感激！
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 種子中RNA的提取
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助各位大神！幫忙看下，我的RNA提取的怎么樣。。。不勝感激！
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】煙曲霉菌提取RNA
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)菌總RNA的提取和RT-PCR
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【專題】各位看看我提取的ＲＮＡ怎么樣啊
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】RNA提的不好，基本都降解的話，逆轉(zhuǎn)錄后再PCR會(huì)是什么結(jié)果？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】尋高手解答：提取質(zhì)粒老是降解怎么回事？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】怎么才能減少RNA提取中RNA 的講解
已經(jīng)有15人回復(fù)
wanjunfei153
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 160.9
- 散金: 120
- 帖子: 40
- 在線: 77小時(shí)
- 蟲號(hào): 1099658
- 注冊(cè): 2010-09-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
7樓2014-03-27 12:38:32
biostar2009
專家顧問(wèn) (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +220 - MolEPI: 20
- 應(yīng)助: 231 (大學(xué)生)
- 金幣: 10391.9
- 散金: 387
- 紅花: 63
- 帖子: 540
- 在線: 151.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2811882
- 注冊(cè): 2013-11-19
- 專業(yè): 生物化學(xué)
- 管轄: 分子生物
★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-03-27 15:12:45
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-03-27 15:12:45
|
只要你不往管子里吐口水，RNA幾乎不會(huì)降解，我抽的RNA經(jīng)常桌上放好幾天放忘了，拿去測(cè)序還是好好的。我們的槍頭都是實(shí)驗(yàn)室大叔徒手抓進(jìn)盒子的，雖說(shuō)也是進(jìn)口的散裝的。 如果你用的試劑，實(shí)驗(yàn)室其余人搞得好，只有在你這才出問(wèn)題，那么你首先看看你的材料有沒(méi)有問(wèn)題，比如細(xì)胞，是不是已經(jīng)半死不活了，這種細(xì)胞RNA已經(jīng)開(kāi)始降解了。 然后你檢測(cè)RNA跑得膠，有沒(méi)有問(wèn)題，要是別人有確認(rèn)好的樣品你可以帶上一個(gè)。 |
6樓2014-03-27 09:40:12
biostar2009
專家顧問(wèn) (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +220 - MolEPI: 20
- 應(yīng)助: 231 (大學(xué)生)
- 金幣: 10391.9
- 散金: 387
- 紅花: 63
- 帖子: 540
- 在線: 151.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2811882
- 注冊(cè): 2013-11-19
- 專業(yè): 生物化學(xué)
- 管轄: 分子生物
9樓2014-03-27 14:04:35
Hliotrope
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 44 (小學(xué)生)
- 金幣: 2650.4
- 散金: 200
- 紅花: 10
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 1304
- 在線: 931.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 2382127
- 注冊(cè): 2013-03-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 藥物學(xué)
4樓2014-03-27 09:05:28
biostar2009
專家顧問(wèn) (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +220 - MolEPI: 20
- 應(yīng)助: 231 (大學(xué)生)
- 金幣: 10391.9
- 散金: 387
- 紅花: 63
- 帖子: 540
- 在線: 151.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2811882
- 注冊(cè): 2013-11-19
- 專業(yè): 生物化學(xué)
- 管轄: 分子生物
★ ★ ★ ★
gyesang: 金幣+4, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-03-31 22:20:18
gyesang: 回帖置頂 2014-03-31 22:20:25
gyesang: 金幣+4, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-03-31 22:20:18
gyesang: 回帖置頂 2014-03-31 22:20:25
|
用agarose gel判斷total RNA的完整性，最重要的指標(biāo)是條帶的完整性，也就是說(shuō)，在28S 18S之間，兩者的上下方，有沒(méi)有彌散性的條帶，注意是彌散性而不是很sharp的條帶，因?yàn)檫@個(gè)取決于你的上樣量，你要是跑10μg甚至更多的total RNA，這些地方就能看見(jiàn)其他的sharp 條帶。一般而言上500 ng足矣。 因?yàn)橐话闩躷otal RNA不會(huì)用很高濃度的膠，1.5%最高了，所以5S和tRNA經(jīng)常是一個(gè)smear狀的，1%左右的時(shí)候無(wú)法區(qū)分5S和tRNA，高一點(diǎn)還可以看見(jiàn)5S下方還有一個(gè)彌散性的tRNA。這些小RNA因?yàn)槭莝mear狀的，所以經(jīng)常顯得亮一些。 最后，如果你是跑的EB膠先加到agarose里面的，要注意多跑一會(huì)，這個(gè)經(jīng)常出現(xiàn)，不單單是total RNA，個(gè)人理解是這些較大的條帶還沒(méi)有充分吸收EB，如果你就跑一會(huì)會(huì)，肯定是最小的最亮。 |
20樓2014-03-28 07:55:44
dizang2
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 187
- 帖子: 151
- 在線: 135.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 2443925
- 注冊(cè): 2013-05-01
- 專業(yè): 細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)與分化
2樓2014-03-26 23:39:15
a315188797
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 33.5
- 散金: 5
- 帖子: 33
- 在線: 25.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 2576984
- 注冊(cè): 2013-08-01
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2014-03-27 08:32:51
WAX2010
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1977.6
- 散金: 39
- 紅花: 5
- 帖子: 208
- 在線: 212.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1134557
- 注冊(cè): 2010-10-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
5樓2014-03-27 09:34:43
cgspider
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 37 (小學(xué)生)
- 金幣: 2264.9
- 散金: 23
- 紅花: 3
- 帖子: 495
- 在線: 286.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1490494
- 注冊(cè): 2011-11-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
8樓2014-03-27 13:32:40
_hwq
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 74
- 帖子: 8
- 在線: 2.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2663017
- 注冊(cè): 2013-09-17
- 專業(yè): 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)
10樓2014-03-27 14:09:45
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 小牛石刀 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 司空. 2026-03-18 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+4
|
.6lL 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | lemonzzn 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 化工學(xué)碩306求調(diào)劑 +10 | 42838695 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +8 | 陌宸希 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 被我言中：新模板不強(qiáng)調(diào)格式了，假專家開(kāi)始管格式了 +4 | beefly 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6 | 丶宏Sir 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工專碩調(diào)劑 +5 | heming3743 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械專碩325，尋找調(diào)劑院校 +3 | y9999 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +4 | 威化餅07 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | z1z2z3879 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 芬達(dá)46 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|