 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 8159 | 回復(fù): 5 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 博學(xué)EPI ，點擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
糖包子007銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
求助：氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線
|
||
|
谷氨酸 亮氨酸 天冬氨酸 纈氨酸 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿大連理工大學(xué)材料求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
材料與化工調(diào)劑一志愿大連海事085600，349
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿中海洋320化學(xué)工程與技術(shù)學(xué)碩求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料科學(xué)與工程調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
311求調(diào)劑一志愿合肥工業(yè)大學(xué)
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿食品科學(xué)與工程083200求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料科學(xué)與工程求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
一志愿北化085600材料專碩275|有文章專利｜求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085600材料與化工調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 食品中用什么來補充蛋白質(zhì)最好
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 過氧化氫酶測定
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 蛋白質(zhì)氨基酸含量測定
已經(jīng)有8人回復(fù)
- BSA做考馬斯亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 離子色譜混標(biāo)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 凱氏定氮法可以測食品中的氨基酸含量嗎
已經(jīng)有11人回復(fù)
- HPLC外標(biāo)法怎么計算？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 測蛋白水解液中的多肽，你們都選擇什么標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)做標(biāo)準(zhǔn)曲線呢？
已經(jīng)有37人回復(fù)
- RT-qPCR實驗問題
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 標(biāo)準(zhǔn)曲線如何做？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- HPLC測定血液中氨基酸
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 請問氣相色譜和液相色譜都分別適合哪些物質(zhì)的檢測？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- mott-schottky曲線得到平帶電位與摻雜濃度，如何計算導(dǎo)帶價帶位置？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 請教熒光定量軟件溶解曲線smooth功能的問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】一氧化氮和二氧化氮的鹽酸萘乙二胺分光光度法
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】茚三酮法測氨基酸含量,蟲蟲們，HELP!
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 茚三酮顯色測氨基酸含量
已經(jīng)有29人回復(fù)
mao816816
木蟲之王 (文壇精英)
- 博學(xué)EPI: 124
- 應(yīng)助: 246 (大學(xué)生)
- 貴賓: 3.014
- 金幣: 189882
- 散金: 5300
- 紅花: 465
- 帖子: 35974
- 在線: 6362.8小時
- 蟲號: 495632
- 注冊: 2008-01-15
- 專業(yè): 應(yīng)用有機化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
糖包子007: 金幣+9, 謝謝 我需要的是高效液相色譜所作的標(biāo)準(zhǔn)曲線 2014-04-04 12:18:44
糖包子007: 金幣+9, 謝謝 我需要的是高效液相色譜所作的標(biāo)準(zhǔn)曲線 2014-04-04 12:18:44
|
1．原理 氨基酸在堿性溶液中能與茚三酮作用，生成藍(lán)紫色化合物(除脯氨酸外均有此反應(yīng))，該藍(lán)紫色化合物的顏色深淺與氨基酸含量成正比，其最大吸收波波長為570 nm，據(jù)此可以用吸光光度法測定樣品中氨基酸含量。 2．儀器 可見分光光度計。 3.試劑 ①2％茚三酮溶液：稱取茚三酮1 g于盛有35 mL熱水的燒杯中使其溶解，加入40 mg氯化亞錫(SnCl2·H2O)，攪拌過濾(作防腐劑)。濾液置冷暗處過夜，加水至50 mL，搖勻備用。 ②pH 8．04磷酸緩沖溶液：準(zhǔn)確稱取磷酸二氫鉀(KH2P04)4．5350 g于燒杯中，用少量蒸餾水溶解后，定量轉(zhuǎn)入500 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。 注意點：http://1000eb.com/va94 準(zhǔn)確稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4)11．9380 g于燒杯中，用少量蒸餾水溶解后，定量轉(zhuǎn)入500 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。 取上述配好的磷酸二氫鉀溶液lO．0mL與190mL磷酸氫二鈉溶液混合均勻，即為pH8．04的磷酸緩沖溶液。 ③氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取干燥的氨基酸(如異亮氨酸)O．200 0 g于燒杯中，先用少量水溶解后，定量轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度線，搖勻。準(zhǔn)確吸取此液10．O mL于100 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻。此為200µg·mL-1氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。 4．操作步驟 ①樣品處理：準(zhǔn)確稱取粉碎樣品5～lO g或吸取液體樣品5～10 mL，置于燒杯中，加入50 mL蒸餾水和5 g左右活性炭，加熱煮沸，過濾，用30～40 mL熱水洗滌活性炭，收集濾液于100 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻備測。 ②標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：準(zhǔn)確吸取200mol·L-1的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液O．O、O．5、1．O、1．5、2．0、2．5、3．0 mL(相當(dāng)于O、100、200、300、400、500、600µg氨基酸)，分別置于25 mL容量瓶或比色管中，各加水補充至容積為4．O mL然后加入茚三酮和磷酸緩沖溶液各1 mL，混合均勻，于水浴上加熱15 min，取出迅速冷至室溫，加水至刻度，搖勻。靜置15 min后，在570nm波長下，以試劑空白為參比液測定其余各溶液的吸光度A。以氨基酸的含量(微克數(shù))為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ③樣品的測定：吸取澄清的樣品溶液1～4 mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制作步驟，在相同條件下測定吸光度A值，用測得的A值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可查得對應(yīng)氨基酸含量。 5．計算 X= c÷(m×1000) ×100 式中：x——樣品氨基酸的含量，µg·(100 g)-1； c——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的氨基酸的含量，µg； m——測定的樣品溶液相當(dāng)于樣品的質(zhì)量，g。 6．說明 茚三酮在放置過程中易被氧化呈淡紅色或深紅色，使用前須進(jìn)行純化，方法為：取10 g茚三酮溶于40 mL熱水中，加入l g活性炭，搖動1 min，靜置30 min，過濾。將濾液放人冰箱中過夜，即出現(xiàn)藍(lán)色結(jié)晶，過濾，用2 mL，冷水洗滌結(jié)晶，置干燥器中干燥，裝瓶備用。 |
4樓2014-04-03 16:41:50
煉獄之火
至尊木蟲 (知名作家)
逆水行舟，不進(jìn)則退
- 博學(xué)EPI: 52
- 應(yīng)助: 258 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.228
- 金幣: 13217.6
- 散金: 1402
- 紅花: 44
- 沙發(fā): 4
- 帖子: 6185
- 在線: 787.9小時
- 蟲號: 2862838
- 注冊: 2013-12-11
- 專業(yè): 催化化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
糖包子007: 金幣+10, 博學(xué)EPI+1, 謝謝 我需要的是高效液相色譜所作的標(biāo)準(zhǔn)曲線 2014-04-04 12:17:48
糖包子007: 金幣+10, 博學(xué)EPI+1, 謝謝 我需要的是高效液相色譜所作的標(biāo)準(zhǔn)曲線 2014-04-04 12:17:48
以下是本人查到的相關(guān)資料，希望可以幫到你 （另附標(biāo)準(zhǔn)曲線制作圖表）標(biāo)準(zhǔn)曲線是溶液中氨基酸濃度與溶液吸光度關(guān)系的函數(shù)曲線。 一般濃度越大，吸收度越高，肯定是正比例曲線，關(guān)鍵還是要看看你是如何測定的？測定數(shù)據(jù)是什么，測定出的數(shù)據(jù)的線性如何？ 線性非常重要啊，一定要計算一下注明啊，否則一切白搭。 OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度，是檢測方法里出現(xiàn)的專有名詞 :光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。 那么10mm比色皿測得OD值就應(yīng)該是5mm比色皿測得OD值的2倍. 國標(biāo)實驗方法： 分別吸取0.0,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml氨基酸工作液于一組25ml容量瓶中，各加水4ml,加水至4ml比較好 ，ph8.0磷酸緩沖液0.5ml和2%茚三酮溶液0.5ml,在沸水加熱15min,，冷卻改為迅速冷卻 后加水定容至25ml,放置10min后,用5mm比色杯在570nm處測定吸光度.將測得的吸光度與相應(yīng)的谷基酸濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線. 谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)液:稱取100mg的谷氨酸(純度不低于99%)溶于100ml水中,作為母液.準(zhǔn)確吸取5ml母液,加水定容至50ml作為工作液(1ml含谷氨酸0.1mg) 試液配制部分請再核查: pH8.0磷酸鹽緩沖液: 按GB 8313—87《茶 茶多酚測定》中3.2的規(guī)定,配制1/15M磷酸氫二鈉(3.2.1)和 1/15M磷酸二氫鉀(3.2.2)溶液。然后取1/15M的磷酸氫二鈉溶液95mL和1/15M磷酸二氫 鉀溶液5mL,混勻。 3.2 2％茚三酮溶液: 稱取水合茚三酮(純度不低于99％)2g,加50mL水和80mg氯化亞錫 (GB638—78,分析純),攪拌均勻。分次加少量水溶解,放在暗處,靜置一晝夜,過濾后加水 定容至100mL。茚三酮若變?yōu)槲⒓t色，則需按下法重結(jié)晶：稱取5g 茚三酮溶于15～25mL 熱蒸餾水中，加入0.25g 活性炭，輕輕攪拌。加熱30min 后趁熱過濾，濾液放入冰箱過夜。次日析出黃白色結(jié)晶，抽濾，用1mL 冷水洗滌結(jié)晶，置干燥器干燥后，裝入棕色玻璃瓶保存。 注: 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時,所用蒸餾水,必須是二次蒸餾水。 實驗遇到失敗應(yīng)該是操作或試劑引起的，我認(rèn)為最有可能出錯的地方有兩個： 1. 移取液體時是否是用移液管移的或者是用移液槍移的，特別要提醒的是移液槍會因吸頭的影響而導(dǎo)致加樣量不準(zhǔn)。 2. 沸水加熱時是否會蒸干，因為里面溶液量并不多，15分鐘可能會蒸發(fā)大量水分，使部分茚三酮和氨基酸析出并附在容量瓶壁上而未參加反應(yīng)。我認(rèn)為加熱時應(yīng)該把蓋子蓋上，雖然會被蒸汽沖開，但應(yīng)馬上蓋回去，并在加熱過程中最好偶爾搖動。 |
» 本帖附件資源列表
-
歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲僅提供交流平臺，不對該內(nèi)容負(fù)責(zé)。
本內(nèi)容由用戶自主發(fā)布，如果其內(nèi)容涉及到知識產(chǎn)權(quán)問題，其責(zé)任在于用戶本人，如對版權(quán)有異議，請聯(lián)系郵箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線.xls
2014-04-01 18:36:32, 14.5 K
2樓2014-04-01 18:38:26
lixiaoya8892
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 634.9
- 帖子: 397
- 在線: 11.5小時
- 蟲號: 3096183
- 注冊: 2014-03-28
- 專業(yè): 市場營銷
3樓2014-04-02 10:26:46
mao816816
木蟲之王 (文壇精英)
- 博學(xué)EPI: 124
- 應(yīng)助: 246 (大學(xué)生)
- 貴賓: 3.014
- 金幣: 189882
- 散金: 5300
- 紅花: 465
- 帖子: 35974
- 在線: 6362.8小時
- 蟲號: 495632
- 注冊: 2008-01-15
- 專業(yè): 應(yīng)用有機化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★
糖包子007: 金幣+1 2014-04-07 07:51:00
糖包子007: 金幣+1 2014-04-07 07:51:00
5樓2014-04-04 12:34:46
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿中海洋320化學(xué)工程與技術(shù)學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 披星河 2026-03-30 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 理學(xué)07化學(xué) 303求調(diào)劑 +4 | 睿08 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
[考研] 抱歉 +4 | 田洪有 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08工科求調(diào)劑286 +4 | tgs_001 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 329分求調(diào)劑 +18 | Mr. Z 2026-03-25 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +6 | 來財aa 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +10 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +4 | 蝶舞輕繞 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +8 | RuiFairyrui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 崔wj 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 11408軟件工程求調(diào)劑 +3 | Qiu學(xué)ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 蘆lty 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +7 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 315分求調(diào)劑 +7 | 26考研上岸版26 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 086000調(diào)劑 +3 | 7901117076 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290分調(diào)劑求助 +3 | 吉祥止止陳 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿蘇州大學(xué)初始315（英一）求調(diào)劑 +3 | sbdksD 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +4 | 錦衣衛(wèi)藤椒 2026-03-25 | 4/200 |
|