 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1071 | 回復(fù): 5 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
天湖酒新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
刪除幾個(gè)核苷酸用質(zhì)粒擴(kuò)增誘變可以嗎？ 已有3人參與
|
||
|
我看到質(zhì)粒擴(kuò)增誘變基本是做把一個(gè)點(diǎn)變成另一個(gè)，我想要刪掉幾個(gè)核苷酸，也就編碼4~5個(gè)氨基酸的長度，是不是引物設(shè)計(jì)的時(shí)候去掉就可以了，還是以刪除的位點(diǎn)為中心設(shè)計(jì)引物嗎？ 除了這個(gè)方法，還有什么簡單的方法可以做到定點(diǎn)除去一個(gè)片段？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有79人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 一種比較詳細(xì)的PCR技術(shù)
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 微生物學(xué)考研資料1(沈萍版同步）免幣分享
已經(jīng)有67人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
天湖酒(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-04-02 09:46:23
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
天湖酒(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-04-02 09:46:23
|
看你的回復(fù)，應(yīng)該是在用基于甲基化降解(DpnI)的突變試劑盒 這種試劑盒設(shè)計(jì)引物的時(shí)候要完全互補(bǔ)，擴(kuò)展之后加入DpnI，降解模板 你注意看一下說明書吧，刪除堿基的引物設(shè)計(jì)應(yīng)該也是把刪除的片段置于引物中間 不過一次4-5個(gè)堿基會造成突變效率下降的 還有一類突變試劑盒是PCR后再連接的，引物設(shè)計(jì)是鄰接的，連接之后是一個(gè)完整的質(zhì)粒。 這樣的試劑盒，做刪除突變就比較容易，而且也沒有堿基長度的限制，不過要求引物合成的時(shí)候5‘磷酸化 同時(shí)需要有一個(gè)能擴(kuò)增長片段的高保真酶 如果沒有試劑盒，也沒有能擴(kuò)增長片段的高保真酶，那么你可以在要刪除位點(diǎn)附近，尋找單酶切位點(diǎn)，然后像做重組克隆一樣，把質(zhì)粒雙酶切，然后再連入刪除了堿基的序列（這個(gè)可能要用到OverlapPCR） |
6樓2014-04-02 09:37:43
lihe131
至尊木蟲 (文壇精英)
- 應(yīng)助: 106 (高中生)
- 金幣: 12400.9
- 散金: 3690
- 紅花: 10
- 帖子: 14218
- 在線: 263.6小時(shí)
- 蟲號: 504554
- 注冊: 2008-02-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
2樓2014-04-01 16:51:56
天湖酒
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 180.5
- 帖子: 42
- 在線: 24.1小時(shí)
- 蟲號: 2238879
- 注冊: 2013-01-13
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2014-04-01 20:29:46
lihe131
至尊木蟲 (文壇精英)
- 應(yīng)助: 106 (高中生)
- 金幣: 12400.9
- 散金: 3690
- 紅花: 10
- 帖子: 14218
- 在線: 263.6小時(shí)
- 蟲號: 504554
- 注冊: 2008-02-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
4樓2014-04-01 23:31:19
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑 +3 | vv迷 2026-03-21 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | 某某某某位 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑0854 +3 | assdll 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
[考研] 346求調(diào)劑[0856] +4 | WayneLim327 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +9 | 何潤采123 2026-03-18 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +4 | 小材化本科 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 295復(fù)試調(diào)劑
+8
|
簡木ChuFront 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 295材料求調(diào)劑，一志愿武漢理工085601專碩 +5 | Charlieyq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +5 | @taotao 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué) 學(xué)碩 354求調(diào)劑211或者雙一流 +3 | 我想要讀研究生 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑，是學(xué)校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考博] 招收博士1-2人 +3 | QGZDSYS 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277調(diào)劑 +5 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|