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Hliotrope木蟲 (著名寫手)
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[求助]
電轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài) 已有3人參與
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| 最近要建基因組文庫，需要電轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)，有沒有哪位蟲友做過電轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)的制備，方法是什么？謝謝~~ |
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gyesang: 應(yīng)助指數(shù)+1 2014-04-11 00:31:09
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與熱激法最大的區(qū)別是轉(zhuǎn)化需要的菌體濃度要高得多，因為電擊中有70%以上的菌體會死亡。其次是菌體的離子濃度不能高，不然電擊中會產(chǎn)生電弧，所以熱激用的氯化鈣被替換為10%甘油，用于懸浮和保存。具體方法你可以參照bio-rad公司電轉(zhuǎn)儀的使用手冊，或者具體的某篇文獻(xiàn)。點轉(zhuǎn)方法1990年左右就已成熟，很多文獻(xiàn)采用和改進(jìn)的報道。 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
3樓2014-04-06 10:41:36
樊樊
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，看到也字就一陣心酸，我也在建�？慈藗冋f的TA連接簡單的跟一一樣，為什么我連最基本的都長不出來，后面怎么辦、、8樓2014-04-08 09:58:54
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10樓2014-04-08 19:24:17
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