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Hliotrope木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
電轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài) 已有3人參與
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| 最近要建基因組文庫(kù)，需要電轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)，有沒(méi)有哪位蟲(chóng)友做過(guò)電轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)的制備，方法是什么？謝謝~~ |
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樊樊
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，看到也字就一陣心酸，我也在建。看人們說(shuō)的TA連接簡(jiǎn)單的跟一一樣，為什么我連最基本的都長(zhǎng)不出來(lái)，后面怎么辦、、
8樓2014-04-08 09:58:54
樊樊
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2樓2014-04-06 10:13:10
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與熱激法最大的區(qū)別是轉(zhuǎn)化需要的菌體濃度要高得多，因?yàn)殡姄糁杏?0%以上的菌體會(huì)死亡。其次是菌體的離子濃度不能高，不然電擊中會(huì)產(chǎn)生電弧，所以熱激用的氯化鈣被替換為10%甘油，用于懸浮和保存。具體方法你可以參照bio-rad公司電轉(zhuǎn)儀的使用手冊(cè)，或者具體的某篇文獻(xiàn)。點(diǎn)轉(zhuǎn)方法1990年左右就已成熟，很多文獻(xiàn)采用和改進(jìn)的報(bào)道。 [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
3樓2014-04-06 10:41:36
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4樓2014-04-06 22:08:31
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