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[求助]
蛋白質(zhì)純化 已有4人參與
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大家好，有幾個(gè)問題向大家請(qǐng)教。 我的蛋白是短肽13KD,大腸表達(dá)，純化流程是SP-HIC-Desalting-Q，由于這個(gè)蛋白不穩(wěn)定，SP結(jié)果當(dāng)?shù)鞍缀扛哂?mg/ml時(shí)4度放置兩天就會(huì)出現(xiàn)渾濁，HIC由于使用的NaCl（硫酸銨會(huì)導(dǎo)致蛋白沉淀），不會(huì)出現(xiàn)沉淀，而由于要過Q柱出去內(nèi)毒素和核酸，所以要脫鹽，當(dāng)濃度高于1mg/ml在20mM PB中就會(huì)沉淀，很是頭疼。 PS:1. 請(qǐng)問大家在這個(gè)實(shí)驗(yàn)流程中怎么不讓它沉淀， 2. 上柱子的Buffer中是不是可以添加什么東西呢,尤其是脫鹽過程，達(dá)到不沉淀的目的。 再次謝謝了，由于比較緊迫，請(qǐng)大家支支招吧。 |
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leezz7樓2014-04-17 22:49:31
2樓2014-04-08 13:44:27
yingshi0703
金蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2014-04-08 16:05:00
5樓2014-04-08 20:33:52
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