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LAMME5金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
克隆表達(dá)基因大小不對(duì)了 怎么回事？ 已有2人參與
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| 最近做克隆表達(dá)，先克隆出枯草芽孢桿菌一段基因，連pMA5質(zhì)粒，先轉(zhuǎn)大腸桿菌JM109，酶切驗(yàn)證和PCR驗(yàn)證大小正確，保藏菌種。但是過(guò)了一段時(shí)間后，重新活化菌種，提質(zhì)粒，發(fā)現(xiàn)酶切和PCR驗(yàn)證大小都不對(duì)，基因變小了 這是怎么回事呢 最近很郁悶的啊 擔(dān)心是染菌了 劃線挑單菌落還是不對(duì) 到底是什么原因的呢 求大神指導(dǎo)一下啊 謝謝 |
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cs2951819
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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第一，同學(xué)，你是怎么保藏菌種的？甘油管？第二，保藏了多久？如果保藏時(shí)間過(guò)久，是有可能丟失的，第三，不太可能質(zhì)粒上片段變小，一般都是質(zhì)粒直接丟失？考慮是不是染菌 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
2樓2014-04-08 09:05:33
LAMME5
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6樓2014-04-14 10:38:36
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