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[求助]
大腸桿菌中表達(dá)包涵體 已有1人參與
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在利用大腸桿菌生產(chǎn)重組抗原的過程中遇到以下問題: 1.目的蛋白為包涵體,呈現(xiàn)絮狀粘稠狀,和正常顆粒狀狀態(tài)不同,是何種原因? 2.發(fā)酵后菌體發(fā)黑,是什么原因,對后續(xù)試驗有何影響 3。培養(yǎng)包涵體有哪些注意事項 4。每次試驗配置培養(yǎng)基都一樣,會是培養(yǎng)基原因?qū)е?,2兩種情況嗎 |
金蟲 (正式寫手)
一段遺失的美好
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首先確定目標(biāo)蛋白在你要的沉淀中,然后你的沉淀是呈絮狀的? 第二,細(xì)胞的破碎方式,是高壓均質(zhì)破碎還是超聲破碎的? 第三,發(fā)酵菌體發(fā)黑,是放置時間的問題還是收集后就有黑色? 第四,對于包涵體表達(dá)來說,菌體的質(zhì)量控制比較重要,誘導(dǎo)時候的OD值以及誘導(dǎo)的時間都是至關(guān)重要的。當(dāng)然培養(yǎng)基會對發(fā)酵產(chǎn)生影響。這些都是個人經(jīng)驗和觀點。。。。 |

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