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大腸桿菌中表達(dá)包涵體 已有1人參與
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在利用大腸桿菌生產(chǎn)重組抗原的過(guò)程中遇到以下問(wèn)題： 1.目的蛋白為包涵體，呈現(xiàn)絮狀粘稠狀，和正常顆粒狀狀態(tài)不同，是何種原因？ 2.發(fā)酵后菌體發(fā)黑，是什么原因，對(duì)后續(xù)試驗(yàn)有何影響 3。培養(yǎng)包涵體有哪些注意事項(xiàng) 4。每次試驗(yàn)配置培養(yǎng)基都一樣，會(huì)是培養(yǎng)基原因?qū)е?,2兩種情況嗎 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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yiye1220: 金幣+20, ★★★很有幫助 2014-12-01 10:03:45
yiye1220: 金幣+20, ★★★很有幫助 2014-12-01 10:03:45
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首先確定目標(biāo)蛋白在你要的沉淀中，然后你的沉淀是呈絮狀的？ 第二，細(xì)胞的破碎方式，是高壓均質(zhì)破碎還是超聲破碎的？ 第三，發(fā)酵菌體發(fā)黑，是放置時(shí)間的問(wèn)題還是收集后就有黑色？ 第四，對(duì)于包涵體表達(dá)來(lái)說(shuō)，菌體的質(zhì)量控制比較重要，誘導(dǎo)時(shí)候的OD值以及誘導(dǎo)的時(shí)間都是至關(guān)重要的。當(dāng)然培養(yǎng)基會(huì)對(duì)發(fā)酵產(chǎn)生影響。這些都是個(gè)人經(jīng)驗(yàn)和觀點(diǎn)。。。。 |
2樓2014-06-12 13:46:52
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